ГОСТ 13496.4-93

Группа С19

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

Методы определения содержания азота и сырого протеина

Fodder, mixed fodder and animal feed raw stuff.
Methods of nitrogen and crude protein determination

Дата введения 1995-01-01

Предисловие

1 РАЗРАБОТАН Госстандартом России

ВНЕСЕН Техническим секретариатом Межгосударственного Совета по стандартизации, метрологии и сертификации

2 ПРИНЯТ Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г.

Наименование государства	Наименование национального органа по стандартизации
Киргизская Республика	Киргизстандарт
Республика Молдова	Молдовастандарт
Российская Федерация	Госстандарт России
Республика Таджикистан	Таджикгосстандарт
Туркменистан	Главная государственная инспекция Туркменистана
	Госстандарт Украины

3 Постановлением Комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и сертификации от 02.06.94 N 160 межгосударственный стандарт ГОСТ 13496.4-93 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 01.01.95

4 ВЗАМЕН ГОСТ 13496.4-84

5 ПЕРЕИЗДАНИЕ

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

	Номер пункта












ГОСТ 5962-67








ГОСТ 24104-88

Настоящий стандарт распространяется на все виды кормов, комбикорма и комбикормовое сырье (за исключением минерального происхождения, дрожжей кормовых и паприна) и устанавливает титриметрический (по Кьельдалю) и фотометрический методы определения азота с последующим пересчетом результатов на сырой протеин.

1 Отбор проб

2 Титриметрический метод определения азота по Къельдалю
(основной метод)

Сущность метода заключается в разложении органического вещества пробы кипящей концентрированной серной кислотой с образованием солей аммония, переведении аммония в аммиак, отгонке его в раствор кислоты, количественном учете аммиака титриметрическим методом и расчете содержания азота в исследуемом материале.

2.1 Аппаратура, материалы и реактивы

Весы лабораторные 2-го класса точности по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 200 г.
________________
* С 1 июля 2002 г. вводится в действие ГОСТ 24104-2001 (здесь и далее).

Весы лабораторные 4-го класса точности по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 500 г или другие весы того же класса точности.

Электронагреватели или горелки газовые.

Установка типа Къельдаля или аппарат для отгонки аммиака с водяным паром (см. рисунки 1 и 2).

1 - колба вместимостью 1000 см; 2 - капельная воронка вместимостью 100 см; 3 - каплеуловитель;
4 - холодильник; 5 - приемная колба вместимостью 250 см; 6 - подъемный столик;
7 - колбонагреватель или электроплитка с регулятором температуры,
или газовая горелка

Рисунок 1

1 - приемная колба; 2 - холодильник; 3 - каплеуловитель; 4 - отгонная колба; 5, 9 - воронки;
6, 7, 8 - краны; 10 - парообразователь

Рисунок 2

Капельница для индикатора.

Установка для титрования с бюреткой 2-го класса точности вместимостью 10, 25 или 50 см по ГОСТ 29252 .

Ступки фарфоровые и пестик по ГОСТ 9147 .

Колбы Кьельдаля вместимостью 100, 250 или 500 см.

Воронки стеклянные диаметром 2-3 см по ГОСТ 25336 или втулки Къельдаля.

Колба коническая вместимостью 250 см по ГОСТ 25336 .

Колбы мерные вместимостью 500 и 1000 см по ГОСТ 1770 .

Цилиндры мерные вместимостью 50 и 1000 см по ГОСТ 1770 .

Пипетки с делениями вместимостью 1 и 25 см по ГОСТ 29169 .

Стакан фарфоровый вместимостью 1000 см по ГОСТ 9147 .

Стакан химический вместимостью 50 см по ГОСТ 25336 .

Асбест листовой.

Вещества, предотвращающие выбрасывание жидкости: кусочки фарфора, стеклянные бусинки, свежепрокаленные кусочки пемзы.

Кислота серная концентрированная по ГОСТ 4204 , х. ч., ч. д. а. и стандарт-титр серной кислоты 0,05 моль/дм (0,1 н.) раствор.

Медь сернокислая 5-водная по ГОСТ 4165 , ч. д. а., х. ч.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166 , ч. д. а.

Селен, ч.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962*.
________________
* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000 .

Метиловый красный.

Метиловый голубой или бромкрезоловый зеленый.

Примечание. Допускается использовать аппаратуру, мерную посуду и другие средства измерений, имеющие такие же или лучшие метрологические характеристики.

2.2 Подготовка к испытанию

2.2.1 Подготовка проб к испытанию

Среднюю пробу сена, силоса, сенажа, соломы, зеленых кормов и т.п. измельчают на отрезки длиной 1-3 см; корнеплоды и клубнеплоды разрезают на пластинки (ломтики) толщиной до 0,8 см. Методом квартования выделяют часть средней пробы, масса которой после высушивания должна быть не менее 50 г. Высушивание проб проводят в сушильном шкафу при температуре 60-65 °С до воздушно-сухого состояния.

После высушивания воздушно-сухую пробу размалывают на лабораторной мельнице и просеивают через сито. Трудноизмельчимый остаток на сите после ручного измельчения ножницами или в ступке добавляют к просеянной части и тщательно перемешивают.

Среднюю пробу комбикормов и комбикормового сырья размалывают и просеивают без предварительного подсушивания.

Приготовленные для испытания пробы хранят в стеклянной или пластмассовой банке с притертой пробкой (крышкой) в сухом месте.

Пробы жидких кормов анализируют без предварительной подготовки.

2.2.2 Подготовка реактивов и растворов

2.2.2.1 Приготовление смешанных катализаторов

Катализатор 1. Смешивают 10 весовых частей сернокислой меди, 100 весовых частей серно-кислого калия и 2 весовые части селена, тщательно растирают в ступке до получения мелкозернистого порошка.

Катализатор 2. Смешивают 10 весовых частей сернокислой меди и 100 весовых частей серно-кислого калия, тщательно растирают в ступке до получения мелкозернистого порошка.

При приготовлении катализаторов 1 и 2 допускается заменять сернокислый калий надсерно-кислым калием или сернокислым натрием в том же количестве.

2.2.2.2 Приготовление раствора серной кислоты, содержащей селен

Аморфный или растертый селен, из расчета 5 г на 1 дм кислоты, растворяют при нагревании в концентрированной серной кислоте в термостойкой колбе до обесцвечивания.

2.2.2.3 Приготовление раствора серной кислоты (1/2 HSО)=0,05 моль/дм (0,1 н)

Используют стандарт-титр серной кислоты. Растворы готовят в соответствии с правилами, приложенными к комплекту.

Допускается приготовление раствора серной кислоты (1/2 HSО)=0,05 моль/дм из концентрированной серной кислоты в соответствии с требованиями ГОСТ 25794.1 .

2.2.2.4 Приготовление раствора борной кислоты с массовой концентрацией 4%

40 г борной кислоты растворяют в небольшом количестве теплой воды при нагревании и переносят в колбу вместимостью 1000 см. После охлаждения доводят объем водой до 1000 см.

2.2.2.5 Приготовление смешанного индикатора

При титровании применяют один из следующих индикаторов:

Индикатор 1 - растворяют 0,20 г метилового красного и 0,10 г метиленового голубого в 100 см 96%-ного раствора этилового спирта;

Индикатор 2 - смешивают 3 объема 0,1%-ного раствора бромкрезолового зеленого в этиловом спирте и 1 объем 0,2%-ного раствора метилового красного в этиловом спирте. Хранят индикаторы в темной склянке.

2.2.2.6 Приготовление раствора гидроокиси натрия с массовой долей 33%

330 г гидроокиси натрия растворяют в фарфоровом стакане в 670 см дистиллированной воды.

2.2.2.7 Приготовление раствора гидроокиси натрия с массовой долей 40%

400 г гидроокиси натрия растворяют в фарфоровом стакане в 600 см дистиллированной воды.

2.3 Проведение испытания

2.3.1 Приготовление минерализата

В длинной сухой пробирке, свободно входящей в горло колбы Кьельдаля, взвешивают 0,7-1 г кормов растительного происхождения, комбикормов, 0,3-0,5 г муки животного происхождения или 0,4-0,5 г дрожжей с погрешностью не более 0,001 г. Вставив пробирку в колбу Кьельдаля до ее дна, высыпают навеску и вновь взвешивают пробирку. По разности между первым и вторым взвешиваниями определяют массу навески, взятую для анализа. Минерализацию осуществляют одним из двух способов:

Способ 1. Добавляют в колбу Къельдаля 2 г смешанного катализатора 1 или 8 г катализатора 2. После прибавления катализатора осторожно приливают 10-12 см концентрированной серной кислоты в зависимости от массы навески;

Способ 2. Добавляют в колбу Къельдаля 10 см водного раствора перекиси водорода с массовой долей 30% в качестве окислителя. После прекращения бурной реакции приливают такое же количество концентрированной серной кислоты. Для ускорения сжигания рекомендуется использовать серную кислоту, содержащую селен, приготовленную по п.2.2.2.2.

Содержимое колбы Кьельдаля тщательно перемешивают легкими круговыми движениями, обеспечивая полное смачивание навески. Колбу устанавливают на нагреватель так, чтобы ее ось была наклонена под углом 30-45° к вертикали, в горло колбы вставляют маленькую стеклянную воронку или втулку для уменьшения улетучивания кислоты во время минерализации. Вначале колбу нагревают умеренно, чтобы предотвратить бурное пенообразование.

При нагревании навеску время от времени помешивают вращательными движениями колбы. После исчезновения пены нагревание усиливают, пока жидкость не будет доведена до постоянного кипения. Нагрев считается нормальным, если пары кислоты конденсируются ближе к середине горла колбы Кьельдаля, избегая перегрева стенок колбы, не соприкасающихся с жидкостью. Если используют открытое пламя, то такой перегрев можно предотвратить, помещая колбу на лист асбеста с отверстием по диаметру несколько меньшим, чем диаметр колбы на уровне жидкости.

После того как жидкость обесцветится (допускается слегка зеленоватый оттенок), нагрев продолжают в течение 30 мин. После охлаждения минерализат количественно переносят в отгонную колбу, три раза ополаскивают колбу Къельдаля 20-30 см дистиллированной воды. Общий объем раствора в отгонной колбе должен составлять 200-250 см.

Допускается проводить отгонку непосредственно из колбы Къельдаля. В этом случае для минерализации используют колбу Кьельдаля вместимостью 500 см. Перед отгонкой аммиака минерализат разбавляют 150-200 см дистиллированной воды.

При проведении экспресс-анализа на комбикормовых предприятиях и в период заготовки травянистых кормов допускается следующий способ приготовления минерализата.

Навеску испытуемой пробы массой 0,2-0,3 г помещают в колбу Къельдаля или в пробирку, или в колбу из термостойкого стекла. В колбу с навеской добавляют 4 см, а в пробирку - 3 см водного раствора перекиси водорода с массовой концентрацией 30%. Через 1,5-2 мин в колбу добавляют 5-8 см, а в пробирку - 2 см концентрированной серной кислоты, содержащей селен, приготовленной по 2.2.2.2. Содержимое колбы или пробирки тщательно перемешивают для полного смачивания навески. Колбу или пробирку с навеской помещают на электронагреватель и нагревают до кипения. Затем нагрев увеличивают и минерализацию продолжают до полного обесцвечивания раствора (20-30 мин). Если раствор не осветлился, то нагревание продолжают еще 5-8 мин или охлаждают, приливают 0,5 см раствора перекиси водорода с массовой концентрацией 30% и кипятят до полного обесцвечивания. После охлаждения минерализат количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см, объем раствора доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. В отгонную колбу переносят 50 см раствора минерализата.

2.3.2 Отгонка аммиака и титрование

2.3.2.1 Отгонка аммиака в борную кислоту

В приемную колбу наливают 20 см раствора борной кислоты с массовой концентрацией 4% и 5 капель любого из смешанных индикаторов. Колбу подставляют под холодильник так, чтобы его кончик был погружен в раствор борной кислоты на глубину не менее чем 1 см. Через холодильник пропускают холодную воду.

Отгонную колбу присоединяют к аппарату для отгонки аммиака и через капельную воронку осторожно приливают в колбу с минерализатом раствор гидроокиси натрия с массовой долей 33%. Воронку промывают 2-3 раза 10-15 см дистиллированной воды, оставляя небольшое количество воды в качестве гидрозатвора. Допускается прибавлять раствор гидроокиси натрия до присоединения отгонной колбы к аппарату. В этом случае раствор гидроокиси натрия наливают в отгонную колбу по стенке, стараясь не перемешивать его с минерализатом, и сразу присоединяют к аппарату для отгонки аммиака.

Объем приливаемой гидроокиси натрия зависит от объема серной кислоты, использованной для приготовления минерализата. На каждый кубический сантиметр серной кислоты, оставшейся после окончания процесса минерализации, следует добавлять не менее 3,5 см раствора гидроокиси натрия массовой долей 33%. Если объем оставшейся серной кислоты трудно установить, объем щелочи рассчитывают исходя из объема серной кислоты, взятой для минерализации. Допускается предварительная нейтрализация содержимого отгонной колбы раствором гидроокиси натрия массовой долей 40%, используя любой из индикаторов. Для обеспечения выделения аммиака добавляют дополнительно 1 см раствора гидроокиси натрия массовой долей 40%.

Отгонную колбу нагревают с помощью электронагревателя или газовой горелки. Раствор в отгонной колбе нагревают так, чтобы обеспечить равномерное кипение. Допускается проводить отгонку водяным паром. Чтобы исключить выделение аммиака, вода в парообразователе должна быть подкислена серной кислотой до фиолетовой окраски при применении индикатора 1 и розовой - при применении индикатора 2.

В начале отгонки аммиака цвет раствора в приемной колбе меняется на зеленый. При нормальном кипении объем раствора в приемной колбе через 20-30 мин обычно составляет 150-200 см. При проведении экспресс-анализа время отгонки сокращается до 7-10 мин. Конец отгонки можно установить с помощью красной лакмусовой бумажки. Для этого приемную колбу отставляют от аппарата, предварительно обмыв конец холодильника дистиллированной водой, и подставляют лакмусовую бумажку под стекающие капли дистиллята. Если лакмус не синеет, отгон аммиака закончен. Если лакмус синеет, приемную колбу снова подставляют под холодильник и продолжают отгонку. После окончания отгонки приемную колбу опускают и конец холодильника обмывают дистиллированной водой в приемную колбу. Оттитровывают аммиак из бюретки раствором серной кислоты (1/2 HSO)=0,05 моль/дм до перехода окраски индикатора от зеленой в фиолетовую при применении индикатора 1 и от зеленой в розовую при применении индикатора 2.

2.3.2.2 Отгонка аммиака в серную кислоту

В приемную колбу пипеткой наливают 50 см раствора серной кислоты (1/2 HSO)=0,05 моль/дм. Отгонку ведут способом, указанным в п.2.3.2.1. После окончания отгонки содержимое приемной колбы (избыток раствора серной кислоты (1/2 HSO)=0,05 моль/дм) титруют раствором гидроокиси натрия (NaOH)=0,1 моль/дм до перехода окраски в зеленую.

2.3.2.3 Одновременно с проведением испытания проводят контрольный опыт на загрязнение воды и реактивов аммиаком, исключая взятие навески корма.

Объем серной кислоты, израсходованный на титрование в контрольном опыте при отгонке в борную кислоту, не должен превышать 0,5 см. При отгонке в серную кислоту объем раствора гидроокиси натрия, израсходованный на титрование, должен быть не менее 49,5 см. В случае превышения установленных норм выявляют источники загрязнения реактивов аммиаком и устраняют их.

2.4 Обработка результатов

2.4.1 Массовую долю азота () в испытуемой пробе в процентах при проведении отгонки аммиака в борную кислоту вычисляют по формуле

где - объем раствора серной кислоты, израсходованный на титрование испытуемого раствора, см;

Объем раствора серной кислоты, израсходованный на титрование в контрольном опыте, см;

Поправка к титру раствора серной кислоты (1/2 НSО)=0,05 моль/дм, если он приготовлен не из стандарт-титра;

Масса навески, г;

2.4.2 Массовую долю азота () в испытуемой пробе в процентах при проведении отгонки аммиака в серную кислоту вычисляют по формуле

где - объем раствора гидроокиси натрия (NaOH)=0,1 моль/дм, израсходованный на титрование раствора серной кислоты (1/2 НSО)=0,05 моль/дм в контрольном опыте, см;

Объем раствора гидроокиси натрия (NaOH)=0,1 моль/дм, израсходованный на титрование серной кислоты в испытуемом растворе, см;

Поправка к титру раствора гидроокиси натрия (NaOH)=0,1 моль/дм;

0,0014 - масса азота, эквивалентная массе серной кислоты, содержащейся в 1 см раствора (1/2 НSО)=0,05 моль/дм;

Масса навески, г;

100 - коэффициент пересчета в проценты.

Примечание. При проведении экспресс-анализа полученный результат увеличивают в два раза, так как для отгонки используется лишь половина объема минерализата.

2.4.3 Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений () и между двумя результатами, полученными в разных условиях () (в разных лабораториях, в разное время, при работе на разных приборах и т.д.), при доверительной вероятности =0,95 не должны превышать следующих значений:

где - среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, %;

Среднее арифметическое результатов двух испытаний, выполненных в разных условиях, %.

Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений и испытаний, проведенных в разных условиях, могут иметь иное выражение, оговоренное в нормативно-технической документации на данный вид продукта.

Предельную погрешность результата анализа () при односторонней доверительной вероятности =0,95 вычисляют по формуле

Предельную погрешность результата анализа используют при оценке качества кормов.

Допускается проведение анализа без параллельных определений при наличии в партии исследуемых проб стандартных образцов (СО). В этом случае (при обязательном проведении выборочного статистического контроля сходимости параллельных определений) за результат испытания принимают результат единичного определения, если разница между воспроизведенной и аттестованной в СО массовой долей азота () не превышает

где - аттестованное значение определяемого компонента, взятое из свидетельства на СО, %.

Контрольные анализы образцов исследуемой партии и анализы СО проводят в соответствии с утвержденной научно-технической документацией.

2.4.4 Массовую долю азота в сухом веществе () в процентах вычисляют по формуле

где - массовая доля азота в испытуемой пробе, %;

Массовая доля влаги в испытуемой пробе, %.

2.5 Массовую долю сырого протеина в испытуемой пробе () или в сухом веществе () в процентах вычисляют по формуле

где 6,25 - коэффициент пересчета общего содержания азота на сырой протеин;

Массовая доля азота в испытуемой пробе, %;

Массовая доля азота в сухом веществе, %.

3 Фотометрический индофенольный метод определения азота

Сущность метода заключается в разложении органического вещества пробы концентрированной серной кислотой с образованием солей аммония и последующем фотометрическом определении азота в виде окрашенного индофенольного соединения, образующегося в щелочной среде при взаимодействии с салицилатом и гипохлоритом натрия и имеющего максимум светопоглощения при 655 нм. Концентрация азота в фотометрируемых растворах должна быть 0,01-0,14 мг/см.

3.1 Аппаратура, материалы и реактивы

Весы лабораторные 2-го класса точности по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г или аналогичные по точности и весы лабораторные 4-го класса точности по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 500 г или другие весы того же класса точности.

Измельчитель проб растений ИПР-2.

Соломорезка марки ИСР-1 или других марок.

Сушилка проб кормов марки СК-1 или шкаф сушильный лабораторный с погрешностью поддержания температуры не более 5 °С.

Мельница лабораторная марки МРП-2 или других марок.

Сито с отверстиями диаметром 1 мм.

Фотоэлектроколориметр, имеющий светофильтр с максимумом светопропускания в области 620-670 нм.

Электронагреватель с температурой нагрева 350-400 °С или горелки газовые.

Груша резиновая.

Пробирки из термостойкого стекла вместимостью 50-100 см или колбы из термостойкого стекла вместимостью 100 см.

Дозатор вместимостью 3 см или градуированная пипетка вместимостью 3 см по ГОСТ 29169 .

Пипетка поршневая или пипетка вместимостью 2 см по ГОСТ 29169 .

Шприц-дозатор или градуированные пипетки вместимостью 0,5 и 2,5 см по ГОСТ 29169 .

Дозатор вместимостью 50 см или цилиндр мерный вместимостью 50 см по ГОСТ 1770 .

Колбы Кьельдаля вместимостью 100 и 500 см.

Колбы мерные вместимостью от 100 до 1000 см по ГОСТ 1770 .

Стаканы химические или колбы конические вместимостью 100 см по ГОСТ 25336 .

Бюретки и градуированные пипетки вместимостью до 50 см по ГОСТ 1770 .

Соль динатриевая этилендиамин-N", N", N", N"-тетрауксусной кислоты, 2-водная (трилон Б) по ГОСТ 10652 , х. ч.

Известь хлорная техническая.

Селен, ч.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), стандарт-титр.

3.2 Подготовка к испытанию - по 2.2.1.

3.2.1 Приготовление растворов

3.2.1.1 Приготовление раствора 1

57 г салициловокислого натрия, 17 г калия-натрия виннокислого и 27 г гидроокиси натрия растворяют в 700 см дистиллированной воды. Раствор кипятят около 20 мин для удаления следов аммиака. После охлаждения к полученному раствору добавляют 0,4 г нитропруссида натрия и доводят объем до 1 дм дистиллированной водой. В хорошо закрытой склянке реактив может храниться в холодильнике до 1 мес.

3.2.1.2 Приготовление раствора 2

К 50 см раствора 1 приливают 400 см дистиллированной воды и 10 см раствора гидроокиси натрия (NaOH)=2 моль/дм, затем добавляют 1 г трилона Б. Раствор готовят в день проведения анализа.

3.2.1.3 Приготовление раствора 3

150 г хлорной извести перемешивают в стакане вместимостью 500 см с 250 см дистиллированной воды. В другом стакане 105 г углекислого натрия растворяют в 250 см дистиллированной воды. Оба раствора сливают при постоянном перемешивании. Масса сначала густеет, затем разжижается. Суспензию оставляют на 1-2 сут для отстаивания, затем прозрачную жидкость сливают и декантируют через бумажный фильтр.

В растворе 3 определяют концентрацию активного хлора. Для этого 1 см прозрачного фильтрата раствора 3 разбавляют в конической колбе вместимостью 100 см дистиллированной водой до 40-50 см, прибавляют 2 г йодистого калия и 10 см 1 моль/дм раствора соляной кислоты. Образовавшийся йод оттитровывают раствором тиосульфата натрия (NaSO5НО)=0,1 моль/дм, приготовленного из стандарт-титра, до исчезновения вишневой окраски.

Концентрацию активного хлора (), г/дм, вычисляют по формуле

где - объем раствора тиосульфата натрия (NaSO5НО)=0,1 моль/дм, израсходованный на титрование 1 см раствора 3, см;

0,00355 - масса хлора, соответствующая 1 см раствора тиосульфата натрия (NaSO5НО)=0,1 моль/дм, г;

1000 - коэффициент пересчета.

Раствор 3 хранят в склянке из темного стекла в холодильнике до 1 года.

3.2.1.4 Приготовление раствора 4

Раствор 3 разбавляют дистиллированной водой до концентрации активного хлора 1,2 г/дм и используют для анализа в течение дня.

Объем раствора 3, необходимый для приготовления определенного объема раствора 4, вычисляют по формуле

где 1,2 -требуемая концентрация хлора, г/дм;

Объем раствора 3, необходимый для приготовления см раствора 4, см;

Приготовляемый объем раствора 4, см;

Концентрация активного хлора, г/дм.

3.2.1.5 Приготовление раствора серной кислоты, содержащей селен, - по 2.2.2.2.

3.2.1.6 Приготовление основного раствора хлористого аммония

Навеску 1,919 г хлористого аммония (содержащего 99,5% основного вещества) растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см. Раствор содержит 0,5 мг азота в 1 см.

3.2.1.7 Приготовление растворов сравнения и построение градуировочного графика

Берут восемь пронумерованных мерных колб вместимостью 100 см и приливают из бюретки вместимостью 50 см указанные в таблице 1 объемы основного раствора. Затем в каждую колбу доливают до половины ее объема дистиллированную воду и приливают 3 см концентрированной серной кислоты, содержащей селен, приготовленной по 2.2.2.2, и перемешивают. После охлаждения доводят объемы растворов дистиллированной водой до метки и снова перемешивают.

Таблица 1

Номер колбы	Объем основного раствора, см

Перед началом каждого испытания для построения градуировочного графика из каждой колбы растворов сравнения берут по 0,5 см раствора и помещают в пронумерованные восемь стаканов вместимостью 100 см, затем в каждый стакан добавляют по 50 см раствора 2, перемешивают и добавляют по 2,5 см раствора 4, снова перемешивают и оставляют растворы на 1 ч при комнатной температуре для полного развития окраски.

Оптическую плотность растворов измеряют относительно первого раствора сравнения, не содержащего азот, в кюветах с толщиной просвечиваемого слоя 10 мм, используя красный светофильтр с максимумом пропускания 620-670 нм.

По результатам фотометрирования растворов сравнения строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс значения содержания азота в миллиграммах в 100 см растворов сравнения, а на оси ординат - показатели оптической плотности растворов.

3.3 Проведение испытания

3.3.1 Приготовление минерализата

В длинной сухой пробирке, свободно входящей в горло термостойкой колбы или в пробирку для сжигания, взвешивают 0,2-0,3 г исследуемой пробы корма. Вставив пробирку с навеской в колбу или в пробирку для сжигания до ее дна, высыпают навеску и вновь взвешивают пробирку. По разности между первым и вторым взвешиванием определяют массу навески, взятой для анализа. К навеске добавляют 2 см 30%-ного раствора перекиси водорода. Через 1,5-2 мин добавляют 3 см концентрированной серной кислоты, содержащей селен, и слегка встряхивают. Пробирки или колбы постепенно нагревают до 340-380 °С. Минерализацию проб продолжают до полного обесцвечивания раствора. Если через 1,5-2 ч не происходит обесцвечивания, раствор охлаждают до 60-80 °С, приливают 1 см перекиси водорода и кипятят до полного обесцвечивания.

После обесцвечивания раствор охлаждают, количественно переносят в мерную колбу, доводят дистиллированной водой до 100 см и перемешивают. Допускается проводить минерализацию в калиброванных пробирках.

3.3.2 Фотометрическое определение азота в минерализатах

Для определения азота в коническую колбу или стакан вместимостью 100 см пипеткой или шприцем-дозатором отбирают 0,5 см минерализата, приготовленного по 3.3.1, приливают к нему 50 см раствора 2 и перемешивают, затем прибавляют пипеткой или шприцем-дозатором 2,5 см раствора 4, снова перемешивают и оставляют раствор на 1 ч при комнатной температуре для полного развития окраски.

Оптическую плотность растворов измеряют относительно раствора сравнения, не содержащего азот, в кюветах с толщиной просвечиваемого слоя 10 мм, используя красный светофильтр с максимумом пропускания 620-670 нм.

Если показание прибора для испытуемого раствора превышает показание восьмого раствора сравнения, то исходный раствор минерализата, приготовленный по 3.3.1, разбавляют первым раствором сравнения до оптимальной для фотометрирования концентрации (оптическая плотность 0,2-0,8).

Одновременно проводят контрольный опыт на загрязнение воды и реактивов аммиаком, исключая взятие навески корма.

3.4 Обработка результатов

3.4.1 Массовую долю азота () в процентах в исследуемой пробе вычисляют по формуле

где - содержание азота в навеске (в 100 см раствора), найденное по градуировочному графику, мг;

Содержание азота в 100 см раствора контрольного опыта, найденное по градуировочному графику, мг;

Масса навески, мг.

Если исходный раствор минерализата перед анализом был разбавлен, полученный результат увеличивают во столько раз, во сколько был разбавлен исходный раствор.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Результаты вычисляют до третьего десятичного знака и округляют до второго десятичного знака.

3.4.2 Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений () и между двумя результатами, полученными в разных условиях () (в разных лабораториях, в разное время, при работе на разных приборах и т.д.), при доверительной вероятности =0,95 не должны превышать следующих значений:
________________
* Брак оригинала. - Примечание.

3.4.3 Массовую долю азота в сухом веществе вычисляют по 2.4.4.

3.5 Массовую долю сырого протеина в испытуемой пробе или в сухом веществе вычисляют по 2.5.

ПРИЛОЖЕНИЕ
(обязательное)

Определение содержания азота и вычисление содержания сырого
протеина (ИСО 5983-79)*

________________
* В Российской Федерации см. ГОСТ Р 51417-99 .

Стандарт используется при импортных и экспортных операциях для контроля качества кормов по содержанию в них азота и сырого протеина.

1 Определение

Настоящий международный стандарт устанавливает метод определения содержания азота в кормах для животных по Кьельдалю и метод вычисления содержания сырого протеина.

2 Область применения

Метод не делает различий между белковым и небелковым азотом. Если требуется определить содержание небелкового азота, должны быть использованы соответствующие методы. В некоторых случаях этот метод не позволяет полностью обнаружить азот нитратов и нитритов.

Продукты пищевые сельскохозяйственные. Общее руководство по определению азота методом Кьельдаля.

4 Принцип

Разложение органического вещества серной кислотой в присутствии катализатора, высвобождение продукта реакции щелочью, дистилляция и титрование высвобождающегося аммиака. Вычисление содержания азота и умножение результата на коэффициент 6,25, чтобы получить содержание сырого протеина.

5 Реактивы

Все реактивы должны быть квалификации чистые для анализов. Используемая вода должна быть дистиллированная или вода такой же чистоты.

Все реактивы, за исключением стандартных образцов (5.6), должны быть практически свободны от азотистых соединений.

5.1 Сульфат калия.

5.2 Катализатор.

Предупреждение. Обращается внимание на токсичность соединений ртути. Необходимо соблюдать все меры предосторожности. Растворы, содержащие ртуть, нельзя непосредственно выливать в дренажную систему, а следует собрать для последующей обработки.
, стандартный титрованный раствор или

8 Проведение испытания

8.1 Взятие навески

Взвесить навеску пробы с точностью 1 мг, содержащую 0,005-0,08 г азота. Масса навески должна быть между 0,5 и 2,0 г (предпочтительно 1,0 г).

Примечание. Когда в связи с неоднородностью пробы значение навески больше, чем указано выше, и поэтому ожидаемое содержание азота будет превышать 0,08 г, соответственно увеличивают объем серной кислоты в приемной колбе (см. 8.2.2), если в качестве приемной жидкости используют серную кислоту.

8.2 Определение

Предупреждение! Последующие операции должны проводиться под хорошо вентилируемым колпаком или в вытяжном шкафу.

8.2.1 Разложение органического вещества

Испытуемую навеску количественно переносят в колбу Кьельдаля соответствующей вместимости (обычно 800 см). Добавляют сульфат калия (5.1). Если в качестве катализатора используют ртуть или окись ртути (II), достаточно 10 г сульфата. Когда катализатором служит окись меди (II) или пятиводный сульфат меди (II), требуется 15 г сульфата калия.

Добавляют соответствующее количество катализатора: для всех продуктов могут быть использованы 0,65 г (1 капля) ртути (5.2.1) или 0,7 г окиси ртути (II) (5.2.2). Вместо этого можно применить 0,3 г окиси меди (II) (5.2.3) или 0,9-1,2 г пятиводного сульфата меди (II) (5.2.4). Установлено, что при этом для полного обнаружения азота требуется более длительное сжигание.

Примечание. Когда анализируются продукты с высоким содержанием азота, в качестве катализатора лучше использовать ртуть.

Добавляют 25 см серной кислоты (5.3) для первого грамма сухого вещества навески и 6-12 см на каждый дополнительный грамм сухого вещества (для сжигания крахмала и жира требуется около 6 и 12 см кислоты, соответственно). Тщательно перемешивают, чтобы полностью смочить навеску. Сначала колбу нагревают умеренно, чтобы предотвратить поднятие пены до горла колбы или ее выбрасывание из колбы.

Примечание. Желательно добавить антипенообразующее вещество, как, например, парафиновую смолу (5.4).

Нагревают умеренно, поворачивая время от времени до тех пор, пока масса не обуглится и не исчезнет пена. Затем нагревание усиливают до тех пор, пока не установится равномерное кипение. Нагрев является достаточным, если кипящая кислота конденсируется в середине горла колбы Кьельдаля. Следует избегать перегрева стенок колбы, не находящихся в контакте с жидкостью. Если используют открытое пламя, такой перегрев можно предотвратить путем установления колбы на лист асбеста с отверстием диаметром немного меньше, чем диаметр колбы на уровне жидкости.

Во время нагревания колба должна быть установлена наклонно под углом 30-45° к вертикали.

После осветления жидкости продолжают нагревание в течение 1 ч в случае использования ртутного катализатора или 2 ч в случае использования медного катализатора.

Оставляют остывать. Если холодный минерализат застывает, рекомендуется использовать для сжигания больший объем кислоты, чем указано выше.

8.2.2 Отгонка аммиака

Осторожно добавляют 250-350 см воды для полного растворения сульфатов, перемешивают круговыми движениями и оставляют остывать. Добавляют немного вещества, предотвращающего выбрасывание (5.13). Пипеткой переносят в приемную колбу отгонного аппарата 25 см раствора серной кислоты (1/2 HSO)=0,05 или 0,125 моль/дм (5.9.1). Концентрацию кислоты выбирают в зависимости от ожидаемого содержания азота в навеске (примечание к п.8.1), добавляют 100-150 см воды и несколько капель смешанного индикатора (5.11).

Кончик трубки холодильника погружают в жидкость, содержащуюся в приемной колбе, на глубину не менее 1 см. Медленно по стенкам в колбу Кьельдаля вводят 100 см раствора гидроксида натрия (5.7).

Примечание. Если серной кислоты (5.3) было использовано больше, чем указано (8.2.1, последний абзац), следует пропорционально увеличить объем гидроксида натрия.

Если в качестве катализатора использовались соединения ртути, раствор гидроксида натрия до внесения в колбу смешивают с 25 см раствора тиосульфата (5.8.1).

Примечание. Если добавлять отдельно, тиосульфат может вступить в реакцию с кислотой в колбе с образованием сульфида водорода, что приводит к искажению результатов. Вместо тиосульфата можно использовать гипофосфит (5.8.2). В этом случае нет опасности образования сульфида водорода. 1 г гипофосфита, добавленного в твердом виде после разбавления водой до приливания щелочи, достаточно для осаждения 1 г ртути.

Колбу немедленно присоединяют к отгонному аппарату и нагревают с такой интенсивностью, чтобы за 30 мин собрать 150 см дистиллята. После этого лакмусовой бумагой (5.12) проверяют рН дистиллята на кончике трубки холодильника. Если реакция щелочная, продолжают дистилляцию.

Кончик трубки холодильника сразу после окончания дистилляции вынимают из холодильника, чтобы предотвратить обратное засасывание. Если во время отгонки содержимое приемной колбы становится щелочным, определение повторяют, внося соответствующие изменения. При отгонке аммиака в борную кислоту в приемную колбу отгонного аппарата наливают 100-250 см раствора борной кислоты (5.9.2).

8.2.3 Титрование

Если в качестве поглощающей жидкости была использована серная кислота, ее избыток титруют раствором гидроксида натрия (NaOH)=0,1 или 0,25 моль/дм (5.10.1) до перехода фиолетовой окраски в зеленую.

Если в качестве поглощающей жидкости была использована борная кислота, аммиак титруют раствором серной кислоты (1/2 HSO)=0,05 или 0,125 моль/дм (5.10.2) до перехода окраски раствора от зеленой до фиолетовой.

Если невозможно проводить титрование одновременно с отгонкой, следует титровать сразу после окончания дистилляции, следя за тем, чтобы температура дистиллята не превышала 25 °С. При этих условиях потери аммиака отсутствуют.

8.3 Число определений

Проводят два определения одного образца.

8.4 Холостое определение

Холостое определение проводят, используя сахарозу (5.5) в качестве испытуемой пробы.

8.5 Контрольный анализ

Контрольный анализ проводят путем определения содержания азота в ацетанилиде (5.6.1) или триптофане (5.6.2), добавляя 1 г сахарозы (5.5).

Выбор анализируемого вещества для контрольного анализа зависит от того, насколько легко озоляются испытуемые пробы. Ацетанилид озоляется легко, в то время как триптофан сжигается труднее. Триптофан перед использованием следует высушить.
);

0,06% - при содержании азота больше 6% ().

9.2 Вычисление содержания сырого протеина

Результаты вычисляют с точностью 0,1% ().

10 Протокол испытания

В протоколе испытания следует указать использованный метод и полученный результат. Следует также указать коэффициент пересчета (т.е. 6,25), использованный для пересчета содержания азота на сырой протеин, а также условия выполнения анализа, не указанные в настоящем международном стандарте или рассматриваемые как необязательные, так же как любые обстоятельства, которые могут влиять на результат.

Протокол испытания должен включать все подробности, необходимые для полной идентификации образца.

Текст документа сверен по:
официальное издание
Комбикорма. Часть 4. Корма. Комбикорма.
Комбикормовое сырье. Методы анализа:
Сб. ГОСТов. - М.: ИПК Издательство стандартов, 2002

Определение «сырого» протеина (по методу Кьельдаля)

Определение сырого протеина производят по Къельдалю макро- или микрометодом.

Метод основан на определении азота, а по нему сырого протеина, путем сжигания навески корма в концентрированной серной кислоте. Образующийся при этом аммиак переходит в аммонийную соль серной кислоты. В дальнейшем эта соль разлагается щелочью и в процессе отгонки выделяющийся аммиак улавливается титрованным раствором серной кислоты. Реакции протекают по следующим уравнениям: Сжигание:

NH 2 CH 2 COOH + 3H 2 SO 4 > NH 3 +2СО 2 + 4Н 2 О +3SO 2

2NH 3 + Н 2 SO 4 > (NH 4) 2 SO 4

(NH 4) 2 SO 4 + 2NaOH > 2NH 4 OH + Na 2 SO 4
2NH 4 OH > 2NH 3 + 2H 2 O
2NH 3 + H 2 SO 4 > (NH 4) 2 SO 4

Ход определения. В пробирку помещают около 1 г исследуемого корма (при микрометоде 0,1-0,3 г), взвешивают на аналитических весах и переносят навеску на дно колбы Къельдаля. Для этого на пробирку с кормом надевают небольшой резиновый шланг, подводят ее ко дну опрокинутой колбы и, переворачивая, высыпают содержимое в колбу. Пустую пробирку взвешивают на тех же весах и по разности между массой пробирки с кормом и пустой находят массу навески.

В колбу Къельдаля к навеске корма осторожно приливают 20 мл (при микрометоде 5 мл) концентрированной серной кислоты (из автомата), содержимое аккуратно перемешивают и ставят в наклонном положении на колбонагреватель в вытяжном шкафу. Содержимое колбы доводят до кипения (в начале осторожно, не давая вспениться). При сжигании в колбы периодически добавляют по 3-5 мл перекиси водорода. Перед вливанием катализатора их несколько охлаждают. Сжигают корм до получения светлого раствора.

После осветления жидкость охлаждают, осторожно добавляют небольшое количество дистиллированной воды (100-150 мл) и переливают без потерь в колбу для отгонки на 600-800 мл. Колбу Къельдаля несколько раз промывают дистиллированной водой. Общее количество жидкости в колбе для отгонки не должно превышать половины ее объема. Одновременно в приемную коническую колбу наливают 50 мл 0,1 н раствора серной кислоты, 2-3 капли индикатора метилоранжа и ставят в аппарат Къельдаля, опустив конец стеклянной трубки холодильника в кислоту.

В колбу для отгонки бросают немного пемзы или несколько кусочков цинка для равномерного кипения, приливают осторожно по стенке 80 мл 33%-ного раствора едкого натра (примерно в 4 раза больше, чем взято кислоты для сжигания навески, 30%-ного - 88 мл, 40%-ного - 66 мл), колбу тотчас же закрывают пробкой с каплеуловителем от аппарата, перемешивают и ставят на колбонагреватель.

При нагревании выделяющийся аммиак связывается с 0,1 н раствором серной кислоты. Ведут отгонку аммиака до тех пор, пока капля перегона не перестанет окрашиваться в синий цвет красную лакмусовую бумагу. При хорошем кипении отгон длится 30-40 мин.

После окончания отгонки конец стеклянной трубки холодильника обмывают небольшим количеством дистиллированной воды, собирая ее в приемную колбу. Затем содержимое приемной колбы титруют 0,1 н раствором едкого натра по индикатору метилоранж, определяя избыток серной кислоты. По разности, взятой в приемную колбу серной кислоты (50 мл) и оттитрованной свободной, устанавливают кислоту, связанную с аммиаком.

При расчете содержания азота в навеске учитывают, что 1 мл 0,1 н раствора серной кислоты эквивалентен 0,0014 г азота.

Процентное содержание азота в воздушно-сухом веществе корма вычисляют по формуле 1.

Количество сырого протеина рассчитывают умножением показателей содержания азота на соответствующие коэффициенты, представленные в таблице.

Коэффициенты для пересчета азота

Коэффициенты определены с учетом содержания азота в протеине, которые по кормам колеблются от 13 до 19%.

Данные по определению «сырого» протеина заносят в таблицу 4.

Таблица 4 - Определение «сырого» протеина в корме

ГОСТ 13496.4-93

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

Издание официальное

Стандартинформ

Предисловие

1 РАЗРАБОТАН Госстандартом России

ВНЕСЕН Техническим секретариатом Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации

2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г.

3 Постановлением Комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и сертификации от 02.06.94 № 160 межгосударственный стандарт ГОСТ 13496.4-93 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 01.01.95

4 ВЗАМЕН ГОСТ 13496.4-84

5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Март 2011 г.

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен на территории Российской Федерации в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

УДК 636.085:546.17.06:006.354

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

Группа С19

СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

Методы определения содержания азота и сырого протеина

Fodder, mixed fodder and animal feed raw stuff. Methods of nitrogen and crude protein determination

MKC 65.120 ОКСТУ 9209

Дата введения 1995-01-01

1 Отбор проб

Отбор проб - по ГОСТ 13496.0, ГОСТ 13586.3, ГОСТ 13979.0, ГОСТ 27262.

2 Титриметрический метод определения азота по Кьельдалю (основной метод)

2.1 Аппаратура, материалы и реактивы

Весы лабораторные 2-го класса точности по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 200 г.

Электронагреватели или горелки газовые.

Установка типа Кьельдаля или аппарат для отгонки аммиака с водяным паром (см. рисунки 1 и 2).

* С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001. На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008 (здесь и далее).

Издание официальное

1 - колба вместимостью 1000 см 3 ; 2 - капельная воронка вместимостью 100 см 3 ; 3 - каплеуловитель; 4 - холодильник; 5 - приемная колба вместимостью 250 см 3 ; 6 - подъемный столик; 7 - колбонагреватель или электроплитка с регулятором температуры, или газовая горелка

Рисунок 1

1 - приемная колба; 2 - холодильник; 3 - каплеуловитель; 4 - отгонная колба; 5, 9 - воронки; 6, 7, 8 - краны;

10 - парообразователь

Рисунок 2 42

Капельница для индикатора.

Установка для титрования с бюреткой 2-го класса точности вместимостью 10, 25 или 50 см 3 по ГОСТ 29252.

Ступки фарфоровые и пестик по ГОСТ 9147.

Колбы Кьельдаля вместимостью 100, 250 или 500 см 3 .

Воронки стеклянные диаметром 2-3 см по ГОСТ 25336 или втулки Кьельдаля.

Колба коническая вместимостью 250 см 3 по ГОСТ 25336.

Колбы мерные вместимостью 500 и 1000 см 3 по ГОСТ 1770.

Цилиндры мерные вместимостью 50 и 1000 см 3 по ГОСТ 1770.

Пипетки с делениями вместимостью 1 и 25 см 3 по ГОСТ 29169.

Стакан фарфоровый вместимостью 1000 см 3 по ГОСТ 9147.

Стакан химический вместимостью 50 см 3 по ГОСТ 25336.

Асбест листовой.

Кислота серная концентрированная по ГОСТ 4204, х. ч., ч. д. а. и стандарт-титр серной кислоты 0,05 моль/дм 3 (0,1 н.) раствор.

Калий сернокислый по ГОСТ 4145, х. ч., ч. д. а.

Калий надсернокислый по ГОСТ 4146, ч. д. а.

Медь сернокислая 5-водная по ГОСТ 4165, ч. д. а., х. ч.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, ч. д. а.

Перекись водорода по ГОСТ 10929, водный раствор с массовой долей 30 %.

Кислота борная по ГОСТ 9656, ч. д. а.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х. ч. или ч. д. а., водный раствор с массовой долей 33-40 %; 0,1 моль/дм 3 раствор гидроокиси натрия, приготовленный по ГОСТ 25794.1.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962*.

Метиловый красный.

Метиловый голубой или бромкрезоловый зеленый.

2.2 Подготовка к испытанию

2.2.1 Подготовка проб к испытанию

Среднюю пробу сена, силоса, сенажа, соломы, зеленых кормов и т. п. измельчают на отрезки длиной 1-3 см; корнеплоды и клубнеплоды разрезают на пластинки (ломтики) толщиной до 0,8 см. Методом квартования выделяют часть средней пробы, масса которой после высушивания должна быть не менее 50 г. Высушивание проб проводят в сушильном шкафу при температуре 60-65 °С до воздушно-сухого состояния.

Пробы жидких кормов анализируют без предварительной подготовки.

2.2.2 Подготовка реактивов и растворов

2.2.2.1 Приготовление смешанных катализаторов

Катализатор 1. Смешивают 10 весовых частей сернокислой меди, 100 весовых частей сернокислого калия и 2 весовые части селена, тщательно растирают в ступке до получения мелкозернистого порошка.

Катализатор 2. Смешивают 10 весовых частей сернокислой меди и 100 весовых частей сернокислого калия, тщательно растирают в ступке до получения мелкозернистого порошка.

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000.

При приготовлении катализаторов 1 и 2 допускается заменять сернокислый калий надсер-нокислым калием или сернокислым натрием в том же количестве.

2.2.2.2 П р иготовление раствора серной кислоты, содержащей селен

Аморфный или растертый селен, из расчета 5 г на 1 дм 3 кислоты, растворяют при нагревании в концентрированной серной кислоте в термостойкой колбе до обесцвечивания.

2.2.2.3 Приготовление раствора серной кислоты с flLHSOJ = = 0,05 молъ/дм* (0,1 н)

Допускается приготовление раствора серной кислоты с = 0,05 моль/дм 3 из концен

трированной серной кислоты в соответствии с требованиями ГОСТ 25794.1.

2.2.2.4 Приготовление раствора борной кислоты с массовой концентрацией 4 %

40 г борной кислоты растворяют в небольшом количестве теплой воды при нагревании и переносят в колбу вместимостью 1000 см 3 . После охлаждения доводят объем водой до 1000 см 3 .

2.2.2.5 Приготовление смешанного индикатора

При титровании применяют один из следующих индикаторов:

индикатор 1 - растворяют 0,20 г метилового красного и 0,10 г метиленового голубого в 100 см 3 96 %-ного раствора этилового спирта;

индикатор 2 - смешивают 3 объема 0,1 %-ного раствора бромкрезолового зеленого в этиловом спирте и 1 объем 0,2 %-ного раствора метилового красного в этиловом спирте. Хранят индикаторы в темной склянке.

2.2.2.6 Приготовление раствора гидроокиси натрия с массовой долей 33 %

330 г гидроокиси натрия растворяют в фарфоровом стакане в 670 см 3 дистиллированной воды.

2.2.2.7 Приготовление раствора гидроокиси натрия с массовой долей 40 %

400 г гидроокиси натрия растворяют в фарфоровом стакане в 600 см 3 дистиллированной воды.

2.3 Проведение испытания

2.3.1 Приготовление минерализата

способ 1. Добавляют в колбу Кьельдаля 2 г смешанного катализатора 1 или 8 г катализатора 2. После прибавления катализатора осторожно приливают 10-12 см 3 концентрированной серной кислоты в зависимости от массы навески;

способ 2. Добавляют в колбу Кьельдаля 10 см 3 водного раствора перекиси водорода с массовой долей 30 % в качестве окислителя. После прекращения бурной реакции приливают такое же количество концентрированной серной кислоты. Для ускорения сжигания рекомендуется использовать серную кислоту, содержащую селен, приготовленную по п. 2.2.2.2.

колбу, три раза ополаскивают колбу Кьельдаля 20-30 см 3 дистиллированной воды. Общий объем раствора в отгонной колбе должен составлять 200-250 см 3 .

Допускается проводить отгонку непосредственно из колбы Кьельдаля. В этом случае для минерализации используют колбу Кьельдаля вместимостью 500 см 3 . Перед отгонкой аммиака минера-лизат разбавляют 150-200 см 3 дистиллированной воды.

Навеску испытуемой пробы массой 0,2-0,3 г помещают в колбу Кьельдаля или в пробирку, или в колбу из термостойкого стекла. В колбу с навеской добавляют 4 см 3 , а в пробирку - 3 см 3 водного раствора перекиси водорода с массовой концентрацией 30 %. Через 1,5-2 мин в колбу добавляют 5-8 см 3 , а в пробирку - 2 см 3 концентрированной серной кислоты, содержащей селен, приготовленной по 2.2.2.2. Содержимое колбы или пробирки тщательно перемешивают для полного смачивания навески. Колбу или пробирку с навеской помещают на электронагреватель и нагревают до кипения. Затем нагрев увеличивают и минерализацию продолжают до полного обесцвечивания раствора (20-30 мин). Если раствор не осветлился, то нагревание продолжают еще 5-8 мин или охлаждают, приливают 0,5 см 3 раствора перекиси водорода с массовой концентрацией 30 % и кипятят до полного обесцвечивания. После охлаждения минерализат количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см 3 , объем раствора доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. В отгонную колбу переносят 50 см 3 раствора минерализата.

2.3.2 Отгонка аммиака и титрование

2.3.2.1 Отгонка аммиака в борную кислоту

В приемную колбу наливают 20 см 3 раствора борной кислоты с массовой концентрацией 4 % и 5 капель любого из смешанных индикаторов. Колбу подставляют под холодильник так, чтобы его кончик был погружен в раствор борной кислоты на глубину не менее чем 1 см. Через холодильник пропускают холодную воду.

Отгонную колбу присоединяют к аппарату для отгонки аммиака и через капельную воронку осторожно приливают в колбу с минерализатом раствор гидроокиси натрия с массовой долей 33 %. Воронку промывают 2-3 раза 10-15 см 3 дистиллированной воды, оставляя небольшое количество воды в качестве гидрозатвора. Допускается прибавлять раствор гидроокиси натрия до присоединения отгонной колбы к аппарату. В этом случае раствор гидроокиси натрия наливают в отгонную колбу по стенке, стараясь не перемешивать его с минерализатом, и сразу присоединяют к аппарату для отгонки аммиака.

Объем приливаемой гидроокиси натрия зависит от объема серной кислоты, использованной для приготовления минерализата. На каждый кубический сантиметр серной кислоты, оставшейся после окончания процесса минерализации, следует добавлять не менее 3,5 см 3 раствора гидроокиси натрия массовой долей 33 %. Если объем оставшейся серной кислоты трудно установить, объем щелочи рассчитывают исходя из объема серной кислоты, взятой для минерализации. Допускается предварительная нейтрализация содержимого отгонной колбы раствором гидроокиси натрия массовой долей 40 %, используя любой из индикаторов. Для обеспечения выделения аммиака добавляют дополнительно 1 см 3 раствора гидроокиси натрия массовой долей 40 %.

В начале отгонки аммиака цвет раствора в приемной колбе меняется на зеленый. При нормальном кипении объем раствора в приемной колбе через 20-30 мин обычно составляет 150-200 см 3 . При проведении экспресс-анализа время отгонки сокращается до 7-10 мин. Конец отгонки можно установить с помощью красной лакмусовой бумажки. Для этого приемную колбу отставляют от аппарата, предварительно обмыв конец холодильника дистиллированной водой, и подставляют лакмусовую бумажку под стекающие капли дистиллята. Если лакмус не синеет, отгон аммиака закончен. Если лакмус синеет, приемную колбу снова подставляют под холодильник и продолжают отгонку. После окончания отгонки приемную колбу опускают и конец холодильника обмывают дистиллированной водой в приемную колбу. Оттитровывают аммиак из бюретки раствором серной кислоты с ^ДЕ^ОД = 0,05 моль/дм 3 до перехода окраски индикатора от зеленой в фиолетовую при применении индикатора 1 и от зеленой в розовую при применении индикатора 2.

2.3.2.2 Отгонка аммиака в серную кислоту

В приемную колбу пипеткой наливают 50 см 3 раствора серной кислоты с (Vi^SO^ = = 0,05 моль/дм 3 . Отгонку ведут способом, указанным в п. 2.3.2.1. После окончания отгонки содержимое приемной колбы (избыток раствора серной кислоты с (1 / 2 H 2 S0 4) = 0,05 моль/дм 3) титруют раствором гидроокиси натрия с (NaOH) = 0,1 моль/дм 3 до перехода окраски в зеленую.

Объем серной кислоты, израсходованный на титрование в контрольном опыте при отгонке в борную кислоту, не должен превышать 0,5 см 3 . При отгонке в серную кислоту объем раствора гидроокиси натрия, израсходованный на титрование, должен быть не менее 49,5 см 3 . В случае превышения установленных норм выявляют источники загрязнения реактивов аммиаком и устраняют их.

2.4 Обработка результатов

2.4.1 Массовую долю азота (X) в испытуемой пробе в процентах при проведении отгонки аммиака в борную кислоту вычисляют по формуле

(V x - Г 0) X-0,0014-100

где V x - объем раствора серной кислоты, израсходованный на титрование испытуемого раствора, см 3 ;

V 0 - объем раствора серной кислоты, израсходованный на титрование в контрольном опыте, см 3 ;

К- поправка к титру раствора серной кислоты с УДН^Су) = 0,05 моль/дм 3 , если он приготовлен не из стандарт-титра;

2.4.2 Массовую долю азота (X) в испытуемой пробе в процентах при проведении отгонки аммиака в серную кислоту вычисляют по формуле

(К 0 -К^-0,0014-100

где V 0 - объем раствора гидроокиси натрия с (NaOH) = 0,1 моль/дм 3 , израсходованный на титрование раствора серной кислоты с (V 2 H 2 S0 4) = 0,05 моль/дм 3 в контрольном опыте, см 3 ; V x - объем раствора гидроокиси натрия с (NaOH) = 0,1 моль/дм 3 , израсходованный на титрование серной кислоты в испытуемом растворе, см 3 ;

К- поправка к титру раствора гидроокиси натрия с (NaOH) = 0,1 моль/дм 3 ;

0,0014 - масса азота, эквивалентная массе серной кислоты, содержащейся в 1 см 3 раствора с (V 2 H 2 S0 4) = 0,05 моль/дм 3 ; т - масса навески, г;

100 - коэффициент пересчета в проценты.

2.4.3 Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений (d) и между двумя результатами, полученными в разных условиях (D) (в разных лабораториях, в разное время, при работе на разных приборах и т. д.), при доверительной вероятности Р = 0,95 не должны превышать следующих значений:

d = 0,02+0,03Д D = 0,09+0,05!,

X - среднеарифметическое результатов двух испытаний, выполненных в разных условиях, %.

Предельную погрешность результата анализа (Д Е) при односторонней доверительной вероятности Р = 0,95 вычисляют по формуле

Д Е =0,051 + 0,028 X .

Предельную погрешность результата анализа используют при оценке качества кормов. Допускается проведение анализа без параллельных определений при наличии в партии исследуемых проб стандартных образцов (СО). В этом случае (при обязательном проведении выборочного статистического контроля сходимости параллельных определений) за результат испытания принимают результат единичного_определения, если разница между воспроизведенной и аттестованной в СО массовой долей азота (D) не превышает

D = 0,06+0,0332Г атг,

где Х атт - аттестованное значение определяемого компонента, взятое из свидетельства на СО, %.

2.4.4 Массовую долю азота в сухом веществе (ДД в процентах вычисляют по формуле

„ _ Х-100 Д-1 ?

где X - массовая доля азота в испытуемой пробе, %;

W - массовая доля влаги в испытуемой пробе, %.

2.5 Массовую долю сырого протеина в испытуемой пробе (Х 2) или в сухом веществе (Х 3) в процентах вычисляют по формуле

+(+) = 6,25ВД),

где 6,25 - коэффициент пересчета общего содержания азота на сырой протеин;

X- массовая доля азота в испытуемой пробе, %;

Х 1 - массовая доля азота в сухом веществе, %.

3 Фотометрический индофенольный метод определения азота

3.1 Аппаратура, материалы и реактивы

Измельчитель проб растений ИПР-2.

Соломорезка марки ИСР-1 или других марок.

Мельница лабораторная марки МРП-2 или других марок.

Сито с отверстиями диаметром 1 мм.

Фотоэлектроколориметр, имеющий светофильтр с максимумом светопропускания в области 620-670 нм.

Электронагреватель с температурой нагрева 350-400 °С или горелки газовые.

Груша резиновая.

Пробирки из термостойкого стекла вместимостью 50-100 см 3 или колбы из термостойкого стекла вместимостью 100 см 3 .

Дозатор вместимостью 3 см 3 или градуированная пипетка вместимостью 3 см 3 по ГОСТ 29169.

Пипетка поршневая или пипетка вместимостью 2 см 3 по ГОСТ 29169.

Шприц-дозатор или градуированные пипетки вместимостью 0,5 и 2,5 см 3 по ГОСТ 29169.

Дозатор вместимостью 50 см 3 или цилиндр мерный вместимостью 50 см 3 по ГОСТ 1770.

Колбы Кьельдаля вместимостью 100 и 500 см 3 .

Колбы мерные вместимостью от 100 до 1000 см 3 по ГОСТ 1770.

Стаканы химические или колбы конические вместимостью 100 см 3 по ГОСТ 25336.

Бюретки и градуированные пипетки вместимостью до 50 см 3 по ГОСТ 1770.

Аммоний хлористый по ГОСТ 3773, ч. д. а.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, ч. д. а., раствор с (NaOH) = 2 моль/дм 3 .

Натрий салициловокислый, ч. д. а.

Натрий нитропруссидный, ч. д. а.

Калий-натрий виннокислый по ГОСТ 5845, ч. д. а.

Соль динатриевая этилендиамин-N", N", N", N"-тетрауксусной кислоты, 2-водная (трилон Б) по ГОСТ 10652, х. ч.

Кислота серная по ГОСТ 4204, ч. д. а.

Известь хлорная техническая.

Перекись водорода по ГОСТ 10929, раствор массовой концентрации 30 %, х. ч.

Натрий углекислый безводный по ГОСТ 83, ч. д. а.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, ч. д. а.

Калий йодистый по ГОСТ 4232, ч. д. а.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), стандарт-титр.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

3.2 Подготовка к испытанию - по 2.2.1.

3.2.1 Приготовление растворов

3.2.1.1 Приготовление раствора 1

57 г салициловокислого натрия, 17 г калия-натрия виннокислого и 27 г гидроокиси натрия растворяют в 700 см 3 дистиллированной воды. Раствор кипятят около 20 мин для удаления следов аммиака. После охлаждения к полученному раствору добавляют 0,4 г нитропруссида натрия и доводят объем до 1 дм 3 дистиллированной водой. В хорошо закрытой склянке реактив может храниться в холодильнике до 1 мес.

3.2.1.2 Приготовление раствора 2

К 50 см 3 раствора 1 приливают 400 см 3 дистиллированной воды и 10 см 3 раствора гидроокиси натрия с (NaOH) = 2 моль/дм 3 , затем добавляют 1 г трилона Б. Раствор готовят в день проведения анализа.

3.2.1.3 Приготовление раствора 3

150 г хлорной извести перемешивают в стакане вместимостью 500 см 3 с 250 см 3 дистиллированной воды. В другом стакане 105 г углекислого натрия растворяют в 250 см 3 дистиллированной воды. Оба раствора сливают при постоянном перемешивании. Масса сначала густеет, затем разжижается. Суспензию оставляют на 1-2 сут для отстаивания, затем прозрачную жидкость сливают и декантируют через бумажный фильтр.

В растворе 3 определяют концентрацию активного хлора. Для этого 1 см 3 прозрачного фильтрата раствора 3 разбавляют в конической колбе вместимостью 100 см 3 дистиллированной водой до 40-50 см 3 , прибавляют 2 г йодистого калия и 10 см 3 1 моль/дм 3 раствора соляной кислоты. Образовавшийся йод оттитровывают раствором тиосульфата натрия с (Na 2 S 2 0 3 5Н 2 0) = 0,1 моль/дм 3 , приготовленного из стандарт-титра, до исчезновения вишневой окраски.

Концентрацию активного хлора (с), г/дм 3 , вычисляют по формуле

с = 0,00355 V- 1000,

где V - объем раствора тиосульфата натрия с (Na 2 S 2 0 3 5Н 2 0) = 0,1 моль/дм 3 , израсходованный на титрование 1 см 3 раствора 3, см 3 ;

0,00355 - масса хлора, соответствующая 1 см 3 раствора тиосульфата натрия с (Na 2 S 2 0 3 5Н 2 0) = = 0,1 моль/дм 3 , г;

1000 - коэффициент пересчета.

Раствор 3 хранят в склянке из темного стекла в холодильнике до 1 года.

3.2.1.4 Приготовление раствора 4

Раствор 3 разбавляют дистиллированной водой до концентрации активного хлора 1,2 г/дм 3 и используют для анализа в течение дня.

Объем раствора 3, необходимый для приготовления определенного объема раствора 4, вычисляют по формуле

1,2

где 1,2 - требуемая концентрация хлора, г/дм 3 ;

V- объем раствора 3, необходимый для приготовления V l см 3 раствора 4, см 3 ;

V l - приготовляемый объем раствора 4, см 3 ;

с - концентрация активного хлора, г/дм 3 .

3.2.1.5 Приготовление раствора серной кислоты, содержащей селен, - по 2.2.2.2.

3.2.1.6 Приготовление основного раствора хлористого аммония

Навеску 1,919 г хлористого аммония (содержащего 99,5 % основного вещества) растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см 3 . Раствор содержит 0,5 мг азота в 1 см 3 .

3.2.1.7 Приготовление растворов сравнения и построение градуировочного графика

Берут восемь пронумерованных мерных колб вместимостью 100 см 3 и приливают из бюретки вместимостью 50 см 3 указанные в таблице 1 объемы основного раствора. Затем в каждую колбу доливают до половины ее объема дистиллированную воду и приливают 3 см 3 концентрированной серной кислоты, содержащей селен, приготовленной по 2.2.2.2, и перемешивают. После охлаждения доводят объемы растворов дистиллированной водой до метки и снова перемешивают.

Перед началом каждого испытания для построения градуировочного графика из каждой колбы растворов сравнения берут по 0,5 см 3 раствора и помещают в пронумерованные восемь стаканов вместимостью 100 см 3 , затем в каждый стакан добавляют по 50 см 3 раствора 2, перемешивают и добавляют по

2,5 см 3 раствора 4, снова перемешивают и оставляют растворы на 1 ч при комнатной температуре для полного развития окраски.

По результатам фотометрирования растворов сравнения строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс значения содержания азота в миллиграммах в 100 см 3 растворов сравнения, а на оси ординат - показатели оптической плотности растворов.

3.3 Проведение испытания

3.3.1 Приготовление минерализата

Таблица 1

бы постепенно нагревают до 340-380 °С. Минерализацию проб продолжают до полного обесцвечивания раствора. Если через 1,5-2 ч не происходит обесцвечивания, раствор охлаждают до 60-80 °С, приливают 1 см 3 перекиси водорода и кипятят до полного обесцвечивания.

После обесцвечивания раствор охлаждают, количественно переносят в мерную колбу, доводят дистиллированной водой до 100 см 3 и перемешивают. Допускается проводить минерализацию в калиброванных пробирках.

3.3.2 Фотометрическое определение азота в минерализатах

Для определения азота в коническую колбу или стакан вместимостью 100 см 3 пипеткой или шприцем-дозатором отбирают 0,5 см 3 минерализата, приготовленного по 3.3.1, приливают к нему 50 см 3 раствора 2 и перемешивают, затем прибавляют пипеткой или шприцем-дозатором 2,5 см 3 раствора 4, снова перемешивают и оставляют раствор на 1 ч при комнатной температуре для полного развития окраски.

3.4 Обработка результатов

3.4.1 Массовую долю азота (X) в процентах в исследуемой пробе вычисляют по формуле

v _ (т - т х)" ЮО

За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений. Результаты вычисляют до третьего десятичного знака и округляют до второго десятичного знака.

3.4.2 Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений (d) и между двумя результатами, полученными в разных условиях (D) (в разных лабораториях, в разное время, при работе на разных приборах и т. д.), при доверительной вероятности Р = 0,95 не должны превышать следующих значений:

d = 0,03+0,03Х;

D = 0,08+0,07Х,

где X- среднеарифметическое результатов двух параллельных определений, %;

X - среднеарифметическое результатов двух испытаний, выполненных в разных условиях, %. Предельную погрешность результата анализа (Д Е) при односторонней доверительной вероятности Р = 0,95 вычисляют по формуле

Д Е = 0,046+0,039Х

тат единичного определения, если разница между воспроизведенной и аттестованной в СО массовой долей азота (D) не превышает

И = 0,055+0,047Х атг,

где Х ахг - аттестованное значение определяемого компонента, взятое из свидетельства на СО.

3.4.3 Массовую долю азота в сухом веществе вычисляют по 2.4.4.

3.5 Массовую долю сырого протеина в испытуемой пробе или в сухом веществе вычисляют по 2.5.

ПРИЛОЖЕНИЕ (обязател ъное)

Определение содержания азота и вычисление содержания сырого протеина (ИСО 5983-79)*

1 Определение

2 Область применения

Продукты пищевые сельскохозяйственные. Общее руководство по определению азота методом Кьельда-ля.

4 Принцип

5 Реактивы

5.1 Сульфат калия.

5.2 Катализатор.

5.2.1 Ртуть или

5.2.2 Окись ртути (II) (HgO), или

5.2.3 Окись меди (II) (СиО), или

5.2.4 Сернокислая медь (II) пятиводная (CUSO4 5Н2О).

5.3 Серная кислота 1,84 г/см 3 .

* В Российской Федерации см. ГОСТ Р 51417-99.

5.4 Парафиновая смола.

5.5 Сахароза.

5.6 Стандартные образцы.

5.6.1 Ацетанилид, точка плавления 114 °С, содержание азота (N) 10,37 % (т/т).

5.6.2 Триптофан, точка плавления 282 °С, содержание азота (N) 13,37 (т/т).

5.7 Раствор гидроокиси натрия, 33 % (т/т).

5.8 Реактив для осаждения ртути.

5.8.1 Раствор тиосульфата натрия, приготовленный растворением 80 г тиосульфата пятиводного (Na 2 S 2 03 5Н 2 0) в 1000 см 3 воды, или

5.8.2 Гипофосфит натрия или калия.

5.9 Поглощающая жидкость.

5.9.1 Серная кислота с (УгН^ОД = 0,05 и 0,125 моль/дм 3 , стандартный титрованный раствор или

5.9.2 Раствор борной кислоты, 40 г/дм 3 .

5.10 Раствор для титрования.

5.10.1 Гидроокись натрия, с (NaOH) = 0,1 и 0,25 моль/дм 3 , стандартный титрованный раствор или

5.10.2 Серная кислота, с (УгН^ОД = 0,05 и 0,125 моль/дм 3 , стандартный титрованный раствор.

5.11 Смешанный индикатор.

Растворяют 2 г метилового красного и 1 г метиленового голубого в 1000 см 3 95 %-ного (объемный) этанола.

5.12 Лакмусовая бумага.

5.13 Вещества, предотвращающие выбрасывание жидкости: гранулы пемзы или стеклянные бусинки, диаметром 5-7 мм, или кусочки карборунда, промытые соляной кислотой и кальцинированные.

6 Аппаратура

Обычная лабораторная аппаратура, а также:

6.1 Аналитические весы.

6.2 Установки для сжигания, дистилляции и титрования.

7 Образец

Образцы хранят в условиях, не допускающих порчу и изменение состава.

8 Проведение испытания

8.1 Взятие навески

П р имечание. Когда в связи с неоднородностью пробы значение навески больше, чем указано выше, и поэтому ожидаемое содержание азота будет превышать 0,08 г, соответственно увеличивают объем серной кислоты в приемной колбе (см. 8.2.2), если в качестве приемной жидкости используют серную кислоту.

8.2 Определение

8.2.1 Разложение органического вещества

Испытуемую навеску количественно переносят в колбу Кьельдаля соответствующей вместимости (обычно 800 см 3). Добавляют сульфат калия (5.1). Если в качестве катализатора используют ртуть или окись ртути (II), достаточно 10 г сульфата. Когда катализатором служит окись меди (II) или пятиводный сульфат меди (II), требуется 15 г сульфата калия.

Добавляют 25 см 3 серной кислоты (5.3) для первого грамма сухого вещества навески и 6-12 см 3 на каждый дополнительный грамм сухого вещества (для сжигания крахмала и жира требуется около 6 и 12 см 3 кислоты, соответственно). Тщательно перемешивают, чтобы полностью смочить навеску. Сначала колбу нагревают умеренно, чтобы предотвратить поднятие пены до горла колбы или ее выбрасывание из колбы.

П р имечание. Желательно добавить антипенообразующее вещество, как, например, парафиновую смолу (5.4).

Во время нагревания колба должна быть установлена наклонно под углом 30-45° к вертикали.

8.2.2 Отгонка аммиака

Осторожно добавляют 250-350 см 3 воды для полного растворения сульфатов, перемешивают круговыми движениями и оставляют остывать. Добавляют немного вещества, предотвращающего выбрасывание (5.13). Пипеткой переносят в приемную колбу отгонного аппарата 25 см 3 раствора серной кислоты с (V2H2SO4) = = 0,05 или 0,125 моль/дм 3 (5.9.1). Концентрацию кислоты выбирают в зависимости от ожидаемого содержания азота в навеске (примечание к и. 8.1), добавляют 100-150 см 3 воды и несколько капель смешанного индикатора (5.11).

Кончик трубки холодильника погружают в жидкость, содержащуюся в приемной колбе, на глубину не менее 1 см. Медленно по стенкам в колбу Кьельдаля вводят 100 см 3 раствора гидроксида натрия (5.7).

Если в качестве катализатора использовались соединения ртути, раствор гидроксида натрия до внесения в колбу смешивают с 25 см 3 раствора тиосульфата (5.8.1).

Пр имечание. Если добавлять отдельно, тиосульфат может вступить в реакцию с кислотой в колбе с образованием сульфида водорода, что приводит к искажению результатов. Вместо тиосульфата можно использовать гипофосфит (5.8.2). В этом случае нет опасности образования сульфида водорода. 1 г гипофосфита, добавленного в твердом виде после разбавления водой до приливания щелочи, достаточно для осаждения 1 г ртути.

Колбу немедленно присоединяют к отгонному аппарату и нагревают с такой интенсивностью, чтобы за 30 мин собрать 150 см 3 дистиллята. После этого лакмусовой бумагой (5.12) проверяют pH дистиллята на кончике трубки холодильника. Если реакция щелочная, продолжают дистилляцию.

Кончик трубки холодильника сразу после окончания дистилляции вынимают из холодильника, чтобы предотвратить обратное засасывание. Если во время отгонки содержимое приемной колбы становится щелочным, определение повторяют, внося соответствующие изменения. При отгонке аммиака в борную кислоту в приемную колбу отгонного аппарата наливают 100-250 см 3 раствора борной кислоты (5.9.2).

8.2.3 Титрование

Если в качестве поглощающей жидкости была использована серная кислота, ее избыток титруют раствором гидроксида натрия с (NaOH) = 0,1 или 0,25 моль/дм 3 (5.10.1) до перехода фиолетовой окраски в зеленую.

Если в качестве поглощающей жидкости была использована борная кислота, аммиак титруют раствором серной кислоты с (Y2H2SO4) = 0,05 или 0,125 моль/дм 3 (5.10.2) до перехода окраски раствора от зеленой до фиолетовой.

8.3 Число определений

Проводят два определения одного образца

8.4 Холостое определение

Холостое определение проводят, используя сахарозу (5.5) в качестве испытуемой пробы.

8.5 Контрольный анализ

9 Обработка результатов

9.1 Вычисление содержания азота

9.1.1 Метод вычисления и формула

9.1.1.1 Отгонка аммиака в серную кислоту

Если для поглощения аммиака при анализе испытуемой пробы (8.2) и холостом определении (8.4) в приемную колбу были взяты одинаковые объемы серной кислоты, массовую долю азота в процентах вычисляют по формуле

(К 0 - У Х) Т ■ 0,014-100 _ 1,4 (Vq -У х)Т m m

где Vq - объем раствора гидроокиси натрия (5.10.1), использованный при холостом определении, см 3 ;

V\ - объем раствора гидроокиси натрия (5.10.1), использованный при анализе пробы, см 3 ;

Т - нормальность раствора гидроокиси натрия (5.10.1), использованного для титрования; m - масса испытуемой навески, г.

9.1.1.2 Отгонка аммиака в борную кислоту Массовую долю азота в процентах вычисляют по формуле

(V x - Vq)- Т -0,014 -100 _ 1,4 (V x -Vq)*T m m

где Vq - объем раствора серной кислоты (5.10.2), использованный при холостом определении, см 3 ;

V\ - объем раствора серной кислоты (5.10.2), использованный при анализе пробы, см 3 ;

Т - нормальность раствора серной кислоты (5.10.2), использованной для титрования; m - масса испытуемой навески, г.

9.1.1.3 Результат

Массовую долю азота в испытуемой пробе вычисляют как средний арифметический результат двух определений при условии, если удовлетворяются требования к сходимости (см. 9.1.2). Результат выражают с точностью 0,01 % (m/m).

9.1.2 Сходимость

Расхождения между результатами двух определений, выполненных одновременно или сразу друг за другом одним и тем же аналитиком, не должны превышать:

0,03 % - при содержании азота менее 3 % (т/т); 1 % относительно среднего результата при содержании азота от 3 до 6 % (т/т);

0,06 % - при содержании азота больше 6 % (т/т).

9.2 Вычисление содержания сырого протеина

Результаты вычисляют с точностью 0,1 % (т/т).

10 Протокол испытания

В протоколе испытания следует указать использованный метод и полученный результат. Следует также указать коэффициент пересчета (т. е. 6,25), использованный для пересчета содержания азота на сырой протеин, а также условия выполнения анализа, не указанные в настоящем международном стандарте или рассматриваемые как необязательные, так же как любые обстоятельства, которые могут влиять на результат.

Протокол испытания должен включать все подробности, необходимые для полной идентификации образца.

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

	Номер пункта		Номер пункта
		ГОСТ 6709-72
ГОСТ 1770-74		ГОСТ 9147-80
ГОСТ 3118-77		ГОСТ 9656-75
ГОСТ 3773-72		ГОСТ 10652-73
ГОСТ 4145-74		ГОСТ 10929-76
ГОСТ 4146-74		ГОСТ 13496.0-80
ГОСТ 4165-78		ГОСТ 13586.3-83
ГОСТ 4166-76		ГОСТ 13979.0-86
ГОСТ 4204-77		ГОСТ 24104-88
ГОСТ 4232-74		ГОСТ 25336-82
ГОСТ 4328-77		ГОСТ 25794.1-83
ГОСТ 5845-79		ГОСТ 27262-87
ГОСТ 5962-67		ГОСТ 29169-91
		ГОСТ 29252-91

Этот документ был распознан автоматически. В блоке справа Вы можете найти скан-копию. Мы работаем над ручным распознаванием документов, однако это титанический труд и на него уходит очень много времени. Если Вы хотите помочь нам и ускорить обработку документов, Вы всегда можете сделать это , пожертвовав нам небольшую сумму денег.

ГОСТ 13496.4-93

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

Методы определения содержания азота и сырого протеина

Издание официальное

Москва Стандартинформ 2011

ГОСТ 13496.4-93 Прелисловие Г РАЗРАБОТАН Госстандартом России

ВНЕСЕН Техническим секретариатом Межгосудларственного совета по стандартизации. мегрологии и сертификации

2 ПРИНЯТ Межгосуларственным советом но станлартизации. метрологии и сертификации 21 октября 1993 г.

Наименование госу ларетва Наименование наинчиялыкно алпрлиз по стандартизации

Киргизская Республика Кири Республика Моллова Молловастанлари Роскийская Фолерания Госстанларт России

Республика Тлажикистан Тазжикгосстаноар1 Турьменистан Главная тохуляретненная инупекиция Гуркменистана Увраина Госстанаарт Украины

3 Постановлением Комитета Российской Фелерании по стандартизации. метрологии и сертификации от 12.06.94 № 160 межгосуларственный станаарт ГОСТ 13496.34 93 введен в действие непосрелетвенно в качестве государственного сганларта Росениской Федерации с 01.01.95

4 ВЗАМЕН ГОСТ 1346.4 84

> ПЕРЕИЗДАНИЕ. Март 201 г.

И стандартов. 1993

Настоящий стандарт ис может быть позностью или частично воспроизведен. тиражирован и распространен на территории Российской Фелерации в качестве офипиального излания без разре - шения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

УДК 636.085:546.17.06:006.354 Группа C19

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ ГОСТ

Методы определения содержания азота и сырого протенна

Foddec. mined fodder and animal feed raw stuff. Methods of nitrogen and crude protein determination

МКС 65.120 ОКСТУ 9119

Дата ввеленыя 1995-01-01

Настояший станлартл распространяется на вее внлы кормов. комбикорма it сырье (за исключением минерального происхождения. лрожжей кормовых и паприна) и устанавли - вает титриметрический (по Кьсльдалюр и фотоме грическии метолы определения аюта с послелую- шим пересчетом резульгатов Ha сырой протеин.

1 Отбор проб Отбор проб по ГОСТ 13496.0. ГОСТ 1356.3. ГОСТ 13979.10. ГОСТ 27262.

2 Титриметрический метод определения азота по Кьельдалю (основной метод)

Сушиность метода заключается в разложении органического вешества пробы кипяшей кониентрированной серной кислогой с образованием солей аммония. перевелении аммония в аммиак, оггонке его в раствор кислогы, количественном учете аммиака титриметрическим метолом и расчете содержания азота в исследуемом материале.

2.1 Аппарагура. магериалы и реактивы

Весы лабораторные 2-го класса точности по ГОСТ 24104* се наибольшим пределом взвешива - ния 240 г.

Весы лабораторные 4-го класса точности по ГОСТ 24 ИЗ с наибольшим прелелом взвешивания МН) г или другие весы того же класса точности.

Соломорезка марки ИСР-[ или других марок.

Сушилка проб кормов марки СК-[Г или шкаф сушилышый лабораторный с погрешностью полдержания температуры не более 5 °С.

Мелыьшша лабораторная марки МРИ-2 или других марок.

Сито с отверстиями лиаметром Г мм.

Эасктронагреватели или горелки газовые.

Установка типа Кьельлаля или аппарат для опонки аммиака с воляным паром (ем. рисункии 2).

С тиюан 214) г. ввсаен в ГОСТ 24 ИН - 2001. На Российской Фелерании Ист? ГОСТР 53228 - МН\У сассь в далее).

Излаине официальное

ГОСТ 13496.4-93

i калаа высстимое по ИНН капельнан воронки внестимостью ГАО хм 7 хаплеулонитель. У хололильниь. 5 приемная колл EMCO TE MCN TER? isa ум. 4 ислъемныи CTD TTR, т - KAD. Wat qe hare OH

JACK C Pe TOPO TON paTy pe. WAM Pa tosaa горелка

Ee Рисунок |

1 приесмидя колба; 2 | каласуловитсль. Ч опонная колба. А, 3 в. Г.Х краны. 10

Рисунок 2

ГОСТ 13496.4-93

Капельница для индикатора.

Установка для титрования с бюреткой 2-го класса точности вместимостью 19. 25 или 50) ем’ по ГОСТ 29252.

Ступки фарфоровые и пестик по ГОСТ 9147.

Колбы Кьельлаля вместимостью НЮ. 250 или 500 см‘.

Пробирки из термостойкого стекла вместимостью 50 100 см’ или колбы из термостоикого стека вместимостью 100 см*.

Воронки стеклянные лиаметром 2 Зем по ГОСТ 25336 или втулки Кьельлаля.

Колба коническая вместимостью 250 см’ по ГОСТ 25346.

Колбы мерные вместимостью 5) и 1000 см! по ГОСТ 17.

Цилинары мерные вместимостью М) и 1400 см по ГОСТ 177).

Пиветки с лелениями вместимостью Ги 25 см? по ГОСТ 29169.

Стакан фарфоровый вместимостью 1000 см’ по ГОСТ 914$.

Стакан химический вместимостью 50 см’ по ГОСТ 25336.

Асбест листовой.

Вещества. предотврашаюшие выбрасывание жидкости: кусочки фирфора. стеклянные бусинки. свежепрокиленные кусочки пемзы.

Кислота серная концентрированная по ГОСТ 4204. х. ч.. ч.л. а. и станларт-титр серной кислоты 0.05 моль/ам" (0.Ён.) раствор.

Калий сернокислый по ГОСТ 4145, х. ч.. ч. д.а.

Калий надсернокислый по ГОСТ 4146. ч. л.а.

Мель сернокислая 5-волная по ГОСТ 4165. ч. л.а.. х. ч.

Натрий сернокислый безволный по ГОСТ 4166. ч. д. а.

Перскись волорола по ГОСТ НЮ929. волный раствор с массовой лолей 30 “&.

Кислота борная по ГОСТ 9656. ч. д. а.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4338. х. ч. или ч. д. а.. волный раствор с массовой долей 33 4“: Г мольйлм` раствор гиароокиси натрия, приготовленный по ГОСТ 25794.1.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962®.

Метиловый красный.

Метиловый голубой или бромкрезоловый зеленый.

Вола дистиллированная по ГОСТ 6709.

Примечание. Допускается использовать GIADA EY Ps. черную пасуау и прутие средства измерении. имеющие такие же или лучшие метрологические характеристики.

2.2 Полготовка к испытанию

2.21 Июрготовка проб к испытанию

Срелнюю пробу сена. силоса, сенажа. соломы, зеленых кормов и т. п. измельчают на отрезки длиной 1 Зем; корнеплоды и клубиеплолы разрезаюг на пластинки (ломтики) толшиной ло 0.5 см. Меголом квартования вылеляют часть средней пробы. масса которой после высушивания должна быть не менее 50 г. Высушивание проб проволят в сушильном шкафу при температуре 60 69 °С до возлушно-сухого состояния.

После высушивания возлушно-сухую пробу размалывают на лабораторной мельнице и просеивают через сито. Трулноизмельчимый остаток на сите после ручного измельчения ножницами или в ступке лобавляюг к просеянной части и тшательно перемешивают.

Срелнюю пробу комбикормов и комбикормового сырья размалывают и просеивают без прелварительного полеушивания.

Приготовленные аля испытания пробы хранят в стеклянной или пластмассовой банке с притертой пробкой (крышкой) в сухом месте.

Пробы жилких кормов анализируют без прелварительной полгозовки.

2.2.2 Иодготовка реактивов и растворов

2.2.21 Приготовление смешанных катализаторов

Катализатор Смешивают 1 весовых частей сернокислой мели. 100 весовых частей сер- нокислого калия и 2 весовые части селена. пиательно растирают в ступке ло получения мелкозер- нистого порошка.

Катализагор 2. Смешивают |} весовых частей сернокислой мели и ИЮ весовых частеи сер- нокислого калия. ицательно растирают в ступке ло получения мелкозернисгого порошка.

* В Российской Федерации асйствлст ГОСТ 51652- ЖИ

ГОСТ 13496.4-93

При приготовлении катализаторов [и 2 допускается заменять сернокислый калий налеер- нокислым калием или сернокислым натрием в том же количестве.

2.2.2.2 Приготовление раствора серной кислоты, соцержащей се ден

Аморфный или растертый селен. из расчета 9 г ни } ам’ кислоты. растворяют при нагревании 1 кониентрированной серной кислоте в термостонкой колбе ло обесцвечивания.

2.223 Ириеотовление раствора серной кислоты с Cf ASOD = 0.05 (О.Р

Используют стандарт-гитр серной кислоты. Растворы готовят в соответствии с правилами. приложенными к комплекту.

Допускается приготовление раствора серной кислоты с (/Н,5О.) = 9.0 из кониентрированиой серной кислоты в соответствии с требованиями ГОСТ 25794.1.

2.2.24 Приготовление раствора борной кислоты с массовой концентрацией 34“

40 г борной кислоты растворяют в небольшом количестве теплой волы при нагревании и переносят в колбу вместимостью 1000 см’. После охлажления доволят объем водой ло НУЮ см*.

2.2.25 Присотовление индикатора

При титровании применяют олин из следующих инликаторов:

индикатор | растворяют 0.20 г метилового красного и 0.10 г метиленового голубого в 100 см: 96 ‘г-ного раствора этилового снирти:

индикагор 2 смешиваюг 3 объема 0.} “ё-ного раствора бромкрезолового зеленого в этиловом спирге и | объем 0.2 “&-ного раствора метилового красного в этиловом спирте. Храняг инликагоры в темной склянке.

2.2.26 Ириготоваление риствора оидроокиси натрия с мас- совой Цолей 33

330 ггилроокиси пагрия растворяют в фарфоровом стакане в 670 см‘ листиллированной волы.

2.2. Приготовление раствора гидроокиси натрия с мас

совой болен 40%

3400 г гилроокиси натрия растворяют в фарфоровом стакане в 60 см’ дистиллированной волы.

24 Проведение испытания

2.4.1 Приготовление

В длинной сухон пробирке. своболно вхоляшей в горло колбы Кьельлаля. взвешивают 0.7 Lt кормов растительного происхождения. комбикормов. 0.3 0. т муки животного происхождения или 0.4 0.5 гарожжеи с погрешностью не более 0.41 г. Вставив пробирку в колбу Кьельлаля ло ее дна. высыпают навеску и вновь взвешивают пробирку. По разности между первым и вторым взис - шиваниями опрелеляют массу навески. взятую аля анализа. Минерализанию осушествляют олним из лвух способон:

способ |. Добавляют в колбу Кьельлаля 2 г смешанного катализатора [или 8 г катализатора 2. После прибавления катализатора осторожно приливаюг 10 12ем" концентрированной серной кис- лоты в зависимости от массы навески;

способ 2. Добавляют в колбу Къельлаля 10 ем‘ водного раствора перекиси волорола © массовой 30 “ в качестве окислигеля. После ирекращения бурной реакции приливают такое же количество копиентрированной серной кислоты. Для ускорения сжигания рекомендуется использовать

Солержимое колбы Кьельлаля тшательно перемешивают легкими круговыми движениями. обеспечивая полное смачивание навески. Колбу устанавливают на нагреватель так. чтобы ее ось была наклонена пол углом 30 45’ к вертикали. в горло колбы вставляют маленькую стеклянную воронку или втулку для уменьшения улетучивания кислоты во время минерализации. Вначале колбу нагревают умеренно. чтобы предотвратить бурное пенообразование.

Прн нагревании нивеску нремя от времени помешивают врашательными лвижениями колбы. После исчезновения пены нагревание усиливают. пока жидкость не будет довелена ло постоянного кипения. Нанев считается нормальным. если пары кислоты конленсируются ближе к серелине гор- ла колбы Кьельдаля. избегая перегрева стенок колбы. не соприкасающихся с жидкостью. Если ис- пользуют открытое пламя. то такой перегрев можно предотвратить. помешая на лист асбеста с отверстием по лиаметру несколько меньшим. чем лнаметр колбы на уровне жилкости.

После того как жилкость обесиветится (лопускаегся слегка юленоватый оттенок). нагрев прололжают в течение 30 мин. После охлажления минерализат количественно переносят в отгонную

ГОСТ 13496.4-93

колбу. три раза ополаскивают колбу Кьъельлаля 20 30 см’ листиалированнон волы. Общий объем раствора в отгонной колбе должен составлять 214) 25см’.

Допускается проволить отонку непосрелственно из колбы Кьельлаля. В этом случае аля миперализанции используют колбу Кьъельлаля вместимостью УИ) см’. Перел отгонкой аммиака минераанзат разбавляют 15% 200 см’ листиллированной волы.

При провелении экспресс-анализ на комбикормовых прелприятиях и в периол заготовки травянистых кормон лонускается следующий способ приготовления минерилизата.

Навеску испытуемой пробы массой 0.2. 0.3 г помешают в колбу Кьельлаля или в пробирку. или в колбу изтермостойкого стекла. В колбу с навеской лобавляют 4 ем’. а в пробирку - Зсм* волного раствора перекиси водорода с массовой кониентрацией 30 “&. Через 1.5 2 мии в колбу лобавляют5 ем’. а в пробирку 22см’ кониентрированной серной кислоты. солержащей селен. приготовленной но 2.2.2.2. Содержимое колбы или пробирки гшательно перемешивают аля полного смачивания навески. Колбу или пробирку с навеской помещают на олекзронагреватель и нагревают ло кипения. Затем нагрев увеличивают и минерализацию продолжаюг ло полного обесивечивания раствора {20 30 мин). Если раствор не осветлился. то нагревание продолжают еше & 8 мин или охлаждают. приливают 0.5 см’ раствора перекиси водорола с массовой коннептранией 30 “и киня- TAT до полного обесцвечивания. После охлажления минерализат количественно переносят в мерную колб\ вместимостью НЮ см`, объем раствора доволят ло метки листиллированной волой и перемешивают. В опонную колбу переносят 50 см" раствора минерализата.

2.3.2 Отгонка аммиака и титровиние

23.2.1 Отгонки аммиака в вборную киасаотьг

В приемную колбу наливают 20 см: раствора борной кислоты с миссовой кониентрацией 4 и 3 капель любого из смешанных инликаторов. Колбу полетавляют пол хололильник так. чтобы его кончик был погружен в раствор борной кислогы на глубину не менее чем | см. Через хололильник пропускают холодную волу.

Отгонную колбу к аппарату для отгонки аммиака и через капельную воронку осторожно приливают в ко лбу с минерализатом раствор гилроокиси натрия с массовой долей 33 “&. Воронку промывают 2 3 раза 10 15см: дистиллированной волы. оставляя небольшое количество волы в качестве гилрозатвора. Допускается прибавлять раствор тилроокиси натрия ло присоелинения отгонной колбы к аппарату. В этом саучае раствор гидроокиси натрия паливают в отгонную колбу по стенке. стараясь не перемешивать его с минерализатом. и присоелиняют к аппарату аля отгонки аммиака.

Объем приливаемой гилроокиси натрия зависит от объема серной кислоты. использованной аля приготовления минерализата. На каждый кубический сантиметр серной кислоты, оставшейся после окончания процесса минерализации, слелует лобавлять не менее 3.5 см” раствора гидроокиси натрия массовой долей 33“. Если объем оставшеися серной кислоты трудно установить, объем шелочи рассчитывают исхоля из объема серной кислоты. взятой лля минерализации. Допускается прелнарительная нейтрализация содержимого отгонной колбы раствором гилроокиси нагрия мас- совой долей 40“. используя любон из инликаторов. Для обеспечения вылеления аммиака лобавляют лополнительно | см" раствора гидроокиси натрия массовой лолей 40 <.>

Огпонную колбу нагревают с помощью электронагревателя или газовой горелки. Раствор в оггоннои колбе нагревают так. чтобы обеспечить равномерное кипение. Допускается проводить от- гонку воляным паром. Чтобы исключить вылеление аммиака. вола в парообразователе лолжна быть полкислена серной кислотой до фиолетовой окраски при применении индикатора ЁР и po3e- вой - при применении инликагора 2.

В изчале отгонки аммиака ивет раствора в приемной колбе меняется на зеленый. При нор- мальном кипении объем раствора в приемной колбе через 20 30 мин обычно составляет 150 200 см. При провелении экспресе-анализа время отгонки сокрашается ло 7 НЮ мин. Конен отгонки можно установить с помошью красной лакмусовой бумажки. Для этого приемную колбу отетавляют от аппарата. предварительно обмыв конеи холодильника дистиллированной волои, и подставляют лакмусовую бумажку пол стекаюшие капли листиллята. Если лакмус не синеет. отгон аммиака закончен. Если лакмус синеет. приемную колбу снова полетавляют пол хололильник и продолжают отгонку. После окончания отгонки приемную колбу опускают и ко- HOH хололильника обмывают листиллированной водой в приемную колбу. Отгигровывают аммиак избюретки раствором серной кислоты с ("/,Н.$О,) = 0.05 моль/лм‘ ло перехода окраски инаикатора от зеленой в фиолетовую при применении инликатора [и от зеленой в розовую при применении инликатора 2.

ГОСТ 13496.4-93

3.4.22 Отгонка аммиака в серную кислотьг

В приемную колбу пипеткой наливают 50 см‘ раствора серной кислоты с = = 0.05 моль/ам*. Отгонку велут способом. указанным в п. 2.3.2.1. После окончания отгонки солер- жимое приемной колбы (избыток раствора серной кислоты с р = 0.05 моль/лм”) гигруют раствором гилроокиси натрия с (МаОН) = 091 моль/лм” ло перехола окраски в зеленую.

2.4.2.3 Олиовременно е проведением испытания проволят контрольный опыг на загрязнение волы и реактивов аммиаком. исключая взятие навески корма.

Объем серной кислоты, израсхолованный на типювание в контрольном опыте при отгонке в борную кислоту. не лолжен превышать 0.5 см”. При оггонке в серную кислоту объем раствора гилроокиси натрия. израсхолованный на титрование. должен быть не менее 49.5 ем”. В случае превы- шения установленных норм выявляют источники загряшения реактивов аммиаком и устраняют их.

24 Обработка результатов

2.4.1 Массовую долю азога (№) в испытуемой пробе н процентах при провелении отгонки аммиака в борную кислоту вычисляют по формуле

т rae Г объем раствора серной кислоты. израсходованный на титрование испытуемого раствора. см‘: „- объем раствора серной кислоты, израсхолованный па титрование в контрольном опыте. ем": К - поправка к гитру раствора сернон кислоты с СУ,Н,ЗО,) = 0.05 моль/ам", если он пригоговлен ие из станларт-титра: (0.0014 масса азота. эквивалентная массе серной кислогы. содержащейся в | см’ раствора = 0.05 т: т масса навески, г. 100 коэффиииенг пересчета в проценты. 2.4.2 Массовую лолю аюта (№) в испытуемой пробе в процентах при провелении отгонки аммиака в серную кислоту вычисляют по формуле ay - Food 100 . an объем раствора гилроокисн натрия с (МаОН) = 0.1 моль/ам". израсхолованный на титрование раствора серной кислоты с = 0.05 в контрольном опыте, см”. р объем раствора гидроокиси натрия с (МаОН) = 0.1 моль/ам", израсхолованный на титрование серной кислоты в испытуемом растворе. К поправки к титру раствора гилроокиси натрия с { МаОН)} = 0.1 моль/ам"; (0.0014 масса азота. эквивалентная массе серной кислоты. содержащейся в | см’ раствора = 0.05 т: т масса навески. г: 100 коэффиииенг пересчета в проценты.

Примечание. При проведении экепресе-анаали а результат унелачиязаюе в два раза. тах как лан парь полонина объема м инерализата.

За окончательный результат иснытания принимают срелнеарифметическое результатов лвух параллельных определений. Результагы вычисляют ло третьего лесятичного знака и округляют до второго десятичного знаки.

2.4.3 Допускаемые расхложления между результатами лвух параллельных опрелелений (и межлу лвумя резульгатами. полученными в разных условиях (0) (в разных лабораториях. в разное время. при работе на разных приборах и т. л.). при доверительной вероятности Р = 0.95 не лолжны превышать слелуюших значений:

d = 0.02+0.03%, D =

fae XY двух нараллельных определении. “: Xv срелнеарифметическое результатов лвух испытании. выполненных в разных условиях. “©.

ГОСТ 13496.4-93

Допускаемые расхожаения между результатами параллельных определений и испытаний. провеленных в разных условиях. могут иметь иное выражение. оговоренное в нормативно-технической документации на данный вил продукта.

Предельную погрешность результата анализа (^,) при олносторонней доверительной вероят- ности Р = 0.95 вычисляюг по формуле

Прелельную погрешность результата анализа используют при оценке качества кормов.

Допускается проведение анализа без параллельных определений при наличии в партии исследуемых проб станлартных (СО). В этом случае (при обязательном проведении выборочного статистического контроля схолимости параллельных определений} за результат испытания принимают результат елиничного определения. если разница между воспроизвеленной ни аттестованной в СО массовой долей азота (Ру не превышает

D = 0.0670.0334,. гле А, апестованное значенне опрелеляемого компонента, взятое из евнлетельетна на СО. т. Контрольные анализы обра шов исслелуемой партии и анализы со проволят в соответствии с утиержленной научно-технической локументаииен. 2.4.4 Массовую лолю азота в сухом вешестве (№) в процентах вычисляют по формуле

А сию A, = --. en гле Л массовая лоля азота в испытуемой пробе. и массовая доля влаги в испытуемой пробе. Se.

2.5 Массовую лолю сырого протеина в испытуемой пробе (\,) или в сухом вешестве (Х;) в процентах вычисляют по формуле

АХ) = 6.23М А.

где 6.2% ко фырициент пересчета обшего содержания азота па сырой протеин: А массовия лоля азота в испытуемой пробе. “; Х. массовая доля азюта в сухом веществе. “е.

3 Фотометрический индофенольный метод определения азота

Сушность метода заключается в разложении органического вещества пробы кониенгрирован - ной серной кислотой с образованием солей аммония и послелующем фотомстрическом опрелелении аюта в виле окрашенного инлофенольного соединения. образующегося в шелочной среле при взанмолействии с салииилатом и гипохлоритом натрия и имеющего максимум светоноглошения пря 655 нм. Кониентрация аюта в фотометрируемых растворах лолжна быть 0.01 9.

4. Аппаратура. магериалы и реактивы

Весы лабораторные 2-го класса точности по ГОСТ 24104 с наибольшим прелелом взцешивания 20% гили аналогичные по точности н весы лабораторные 4-го класса гочности по ГОСТ 241494 с нанбольшим прелелом взвешивания 5 т или другие весы того же класса точности.

Измельчитель проб растений ИПР-2.

Соломарезка марки ИСР-[ или других марок.

Сушилка проб кормов марки СК-Г или шкаф сушильный лабораторный с погрешностью полдержания температуры не более SC.

Мельиина лабораторная марки МРИ-2 или других марок.

Сито с огверстиями диаметром | мм.

Фотоэлектроколориметр. имеющий светофильгр с максимумом светопропускания в области 620 670 им.

Электронагреватель с температурой нагрева 350) 400 ‘С или горелки газовые.

Груша резиновая.

Пробирки из термостойкого стекла вместимостью 50 100 см’ или колбы из термостоикого стекла вместимостью 100 см*.

До тор вместимостью 3 см? или гралуированиая пипетка вместимостью Зем’! ло ГОСТ 29169.

ГОСТ 13496.4-93

Пипетка поршневая нли пинетка вместимостью 2 см’ по ГОСТ 29169.

Ширии-лозатор или гралуированные пипетки вместимостью 0.5 и 2.5 ем’ по ГОСТ 29109.

Домтор вместимостью 50 см’ или пилинар мерный вместимостью 50 см по ГОСТ 177).

Колбы Кьельлаля вместимостью НЮ и 500 см*.

Колбы мерные вместимостью от 100 ло 1000 см’ по ГОСТ 1770.

Стаканы химические или колбы конические вместимостью НА см по ГОСТ 25346.

Бюретки и гралуированные пинетки вместимостью до 50 см’ по ГОСТ 1770.

Аммоний хлористый по ГОСТ 3773, ч. д. а.

Натрия гидроокись по ГОСТ 43238. ч. д. а.. раствор с (\аОН} = 2

Натрий салицизовокислый, ч. л. а.

Натрий нитропруссидный. ч. д. и.

Калий-натрин виннокислый по ГОСТ 5845. ч. д. а.

Соль динатриевая отилендиамин-№. №. №. У-тетрауксусной кислоты. 2-волиая (грилон Б) по ГОСТ 10652. x. 4.

Kitestota no POCT 4204. a. a. a.

Известь хлорная техническая.

Перекись волорола по ГОСТ 1929. раствор массовой концентраиии 30 х. Ч.

Натрий углекислый безволный по ГОСТ 83. ч. д. а.

Кислота соляная по ГОСТ 311$, ч. д. а.

Калий нолистый по ГОСТ 4232. ч. д.а.

Натрий серноватистокиелый (тносульфат }, станларт- титр.

Boga листиллированная по ГОСТ 6249.

4.2 Поаготовка к испытанию по 2.2.1.

3.2.1 Ириготомаение растворов

3.2.1.1 Ириготовление раствора 1

57 г салиниловокиелого натрия. 17 г калия-натрия виннокислого и 27 г гидроокиси натрия растворяют в 700 см" листиллирюванной воды. Раствор кипятят около 20 мин аля удаления следов аммнака. После охлаждения к полученному раствору добавляют 0.4 г питропруссила натрия и ловолят объем ло Е лм‘ дистиллированной водой. В хорошо закрытой склянке реактив может храниться в холодильнике ло [| мес.

3.2.1.2 Ириготовление раствора 2

К 5) см‘ раствора | приливают 40% см‘ листиллированнои воды и 19 ем` раствора гиароокиси натрия с = 2 моль/лм". шлем добавляют [г трилона Б. Раствор готовят в лень провеления анализа.

3.2.1.3 Ириготоваение раствора 3

150 г хлорной извести перемешивают в стакане вместимостью 500 сме 25) см’ дистиллированной воды. В другом стакане 105 г углекислого натрия растворяют в 250 см’ дистиллированной волы. Оба раствора сливают при постояниом перемешивании. Масса сначала густеет. затем разжижаестся. Суспензию оставляют на | 2 сут аля отстаивания, прозрачную жилкость сливают и лекантируют через бумажный фильтр.

В ристворе 3 опрелеляют коннентрапию активного хлора. Для лого см‘ прозрачного фильтрага раствора 3 разбавляют в конической колбе вместимостью 1) см’ дистиллированной водой ло 40 У ем’. прибавляют 2 г полистого калия и 19 ем` | моль/дм‘ раствора соляной кислоты. Образовавшийся йод оттитровывают раствором тиосульфата натрия с О, ЭН.О) = 0.1 моль/лм*. приготовленного из станларт-титра, ло исчезновения вишневой окраски.

Конненграцию активного хлори (с). г/дм`. вычисляют по формуле

с = 0.00355. РЁ. 1000.

rae Г объем раствора тиосульфата натрия с = 0.1 моль/дм”. изрисхолованиый на титрование Г см* раствора 3. ем”. (1.00355 масса хлора. соответствующая [ см* раствора тиосульфата натрия с (Ма;$.0, SHO) = = 0.1 г: 1000 коэффициент пересчета. Раствор 3 хранят в склянке из темного стекла в хололильнике ло [ гола.

ГОСТ 13496.4-93

3.2.14 Ириготовление раствора 4

Раствор 3 разбавляют листиллированной волой ло кониенграции активного хлора 1.2 т/лм` и используют для анализа в течение лия.

Объем раствора 3. необхолимый лая приготовления определенного объема раствора 4. вычис- ляют по формуле

cae 1.2 требуемая коннентрания хлора. Г обьем раствора 3. необходимый лая приготовления Г; см‘ раствора 4. см: р. приготовляемый объем раствора 4. см”:

« концентрация активного хлора. 3.21.5 Приготовление раствора серной кислоты. содержашей селен. по 2.2.2.2. 3.2.1.6 Ириготовление основного раствора хлористого ам-

Навеску 1.919 г хлористого аммония (солержашего 99.5 основного вешества) растворяют в воле и ловодят объем раствора листиллированной волой ло КАЖ см”. Раствор содержит 0.5 мг азота в | см.

3.2.17} Ириготовление растворов сраннения и построение e pa- графика

Берут восемь пронумерованных мерных колб вместимостью КЮ см’ и приливают из бюретки вместимостью 50 см’ указанные в таблице | объемы осповного раствора. Затем в каждую колбу доливают ло половины се объема листиллированиую нолу и приливают 3 см` кониентрированной сер- ной кислогы. солержишей селен. приготовленной по 2.2.2.2, и перемешивают. После охлаждения ловолят объемы растворов дистиллированной волой до метки и снова перемешивают.

Перел началом кажаого испытания для построения | гралуировочного графика из кажлои колбы растворов Номер хозбы Обьем основнота Солержание лима и ИМ см" сравнения берут neo ().5 ем: раствора. сч PACT Hap сравнения. м раствора и помещаюг в пропумерованные восемь стаканов вместимостью № см”. затем в кажлый стакан лобавдяют по 50 см? раствора 2. перемешивают и добавляют по 2.5 ем‘ раствора 4. снова ne- ремешивают и оставляют рас - тгворы на Ёч при комнатной гемпературе дая полного развития окраски.

Оптическую плотность растворов измеряют относительно первого раствора сравнения, не содержашего азог. в кюветах с толщиной просвечиваемого слоя Ю мм. используя красный светофильтр с максимумом пропускания 620 67) им.

По резульгатам фотомстрирования растворов сравнения строят гралуировочный график. от- кладывая на оси абеписе мачения содержания азота в миллиграммах в 100 см” растворов сравиения. а на оси ординат показатели оптической плотности растворов.

33 Проведение испытания

3.3.1 Приготовление минерализата

В ллинной сухой пробирке. свободно вхоляшей в горло термостойкой колбы или в пробирку для сжигания, взвешивают 0.2 --0.3 г исследуемой пробы корма. Вставин пробирку с навеской в кол- OV или в пробирку лля сжигания ло ее лна. высыпают навеску и вновь взвешивают пробирку. По разности между первым и вгорым взвешиванием опрелеляют массу навески. взятой для анализа. К навеске добавляют 2 ем‘ 30 “-ного раствора перекиси волорола. Через 1.5 2 мин добавляют 3 см* кониенгрированной серной кислоты. солержашей селен, и слегка встряхивают. Пробирки или кол-

ГОСТ 13496.4-93

бы постепенно нагревают ло 340 330 °С. Минерализацию проб продолжают ло полного обесивечн - вания раствора. Если через 1.А 2 не происходит обесивечивания. раствор охлажлаюг до 60 SOC. приливают | ем’ перекиси волорола и кипятят ло полного обесивечивания.

После обесивечивания раствор охлаждают. количественно переносят в мерную колбу, ловодят дистиллированной водой до ЦЮ см? и перемешивают. Допускается проволить минерали в калиброванных пробирках.

3.3.2 Фитометрическое опрецеление азота в минерализатах

Для определения изюта в коническую колбу или стакан вместимостью НЮ см’ пипеткой или ширицем-дозатором отбирают 0.5 см‘ минерализата. приготовленного по 3.3.1. приливают к нему 50 ем“ раствора 2 и перемешивают. затем прибавляют пипеткой или ширинем-дозатором 2.5 см* раствора 4. снова перемешивают и оставляют раствор на | ч при комнатной температуре для полного развития окраски.

Оптическую плотность растворов измеряют относительно раствора сравнения, ие солержаше - го азот. в кюветах с толшиной просвечиваемого слоя 10 мм. используя красный светофильтр с максимумом пропускания 620 670 им.

Если показание прибора для испытуемого раствора превышает показание восьмого раствора сравнения. то исхолный раствор минерализата. приготовленный по 3.3.1. разбавляют первым рас- твором сравнения ло оптимальной лая фютометрирования концентрации (оптическая плотность 0.2 -0.5).

Олновременно проволят контрольный опыт на загрязнение волы и реактивов аммиаком. ис- ключая взятие навески корма.

3.4 Обработка результатов

4.4.1 Массовую лолю азога {Л} в проценгах в исследуемой пробе вычисляют по формуле

Y= (en - amy) UO

Если исхолный раствор минерализата перел анализом был разбавлен, полученный результат увеличивают во столько раз, во сколько был разавлен исхолный раствор.

За окончательный результат испытания принимают срелнеарифметическое результатов двух параллельных определений. Результагы вычисляют ло третьего лесятичного знака и округляют до второго лесятичного знака.

3.4.2 Допускаемые расхожления межлу результатами лвух параллельных определений (и межиу лвумя результатами. полученными в разных условиях (0) (в разных лабораториях. в разное время. при работе на разных приборах и т. л.). при ловерительной вероятности Р= 0.95 не должны превышать слелующих значений:

d = 0.03+0.03%, D = 0.08+0,077.

fae результатов лв\х параллельных опрелелении. т.

Xx Х сролнеарифметическое результатов двух испытаний. выполненных в разных условиях. “®. Прелельную погрешность результата анализа (^,) при олносторонней доверительной вероят-

ности Р = 0.95 вычисляют по формуле А. = 0.046+0.039%.

Допускается проведение анализа без параллельных определений при наличии в партии исследуемых проб станлартных образцов (СО). В этом случае (при обязательном проведении выборочного статистического контроля схолимости параллельных) за результат испытания принимаюг ре зу. 1ь-

ГОСТ 13496.4-93

тат единичного опрелеления. если разиниа межлу воспроижеленной и аттестованной в СО массовой лолеи азота { 2) не превышает

гле А: аттестованиое значение определяемого компонента. взятое из свилетельства на СО. 3.4.3 Миассовую лолю азога в сухом вешестве вычисляют по 2.4.4.

3.5 Массовую лолю сырого протеина в испытуемой пробе или в сухом вешестве вычисляют по 2.5

ПРИЛОЖЕНИЕ

Определенне содержания азота и вычисление содержания сырого протеина (НСО 5983-79)*

Стандарт использстея при импоруныхи экспортных операциях аля контроля качества кормов по содер-

в них зипа и сырого протеина 1 Определение

Назояший межлунароаный станлартг усганавоивает метол ойредеаения содержания ана в кормах дя животных по и мегоз вычисления содержания сырого протеина.

2 Область применения Мета не деласт различий меж лу белковым и небслконым зюточм. Если требуется ипрелелить содержание небелковоо за, лоажны быть использюнаны соответетаующие метолы. В некоторых этот метод не полностью обнаружить азог нитратон и

Продукты пишевые сельсколозчиственные Общее руковолетво по определению анна методом Кьельда-

4 Принции Разложение органического вещества серной кислотой в присмлствии катализатора. высвобождение продукта реахиии шелонью. листилаляция и титрование выснобожлающегося аммиака. Вычисление содержания азота и умножение результати на коэффициент 6.25, чтобы получить содержание сырого протеина

$ Резкгывы

Bee реактивы должны быть казлификаиии чистые для энализав. Используемая вода золжна быть листи.1- лириванная нак виола такий же чистоты.

Boe реактивы. за исключением стандартных образцов (5.6). лоажны практически свобозны огаят- THC TES COC LHC HHS,

51 Сульфат калия

52 Катализатор.

Прелупрежление. Обрашастся внимание на токсичность сослинений рути. Необхолимо соблюмать нее

меры предосторожности содержащие ртуть. нельзя непоерексвенна выливаль в аренажную

му. а следует соорать аля последующей обработки. 5.2.1 Ррть или 3.2.2) Osnteb piv (ИЕ 3. или 5.2.3 Окись мели (ПУ чО), или 3.2.4 Сернокиелия мель (И) пнтивоанан С 650; &3 Серная кислота 1.44

В Российской Федерзиин см. ГОСТР 51417 39.

ГОСТ 13496.4-93

5.4 Парафиноная смола.

А Сахаров.

56 Стандартные образы

36.1 Анстанилил. точка поаваения 113 содержание ата СМР 10.37 9 сии.

56.2 Триитофан. тачка планления 252 С. содержание азота ГУ ТА. 47 сне

5 Растнор тиароокисн натрия, 35 4

А № Реактин для осаждения

Раствер тиосульфата натрия, приготовленный растворением AO г тиосульднна пятивианого

№1150; 1010 см’ воды. иди

5%.2 Гипафиюфит натрия или калия.

$9 Поглощакнияя 4 накость

59.1 Серная кислота с 3) = 0.15 и 0.125 стандартный тигронанный раствор или 534.2 Раствор борной кислоты, 40 гглм®.7 Образеи

Образы хранят в условиях, но допускающих парчу и изменение состана.

8 Провеление испытания

Хх! Взятие навески

Вовесить нансеку пробы с точностью | мс. содержащую 9.005 6.05 газюта. Масса навески важна быть между И.З и 2,0 гапрелпочтиасально 1.01)

Примечини ее. Когла в снязи © неоанородностью пробы значение навески больше, чем указано выше. и поэтому ожидаемое содержание азота булег превышать 09.0 г. соответственно увеличивают объем сер- ной кислоты в приемной кос (ем. Х.2.2). если в качестие приемной жильости ИСПОЛЬЯАюЮТ ССЙНУЮ

Прелупреж ление! Послелукицие операции проводиться под хорошо вентилируемым коллаком пан в шкафу

х.2.1 Размещение органического

Исны цемую навеску количественно переносят в Кьсльлая соответствукииеи вместимости (обыч- но $00 хм) Добаваяют суълыфат калия 15 |}. Если в качестве катализатора или окись Пели 1. достаточни 10 т сульфата Когаз катализатором служит окись меди (Ирили пятивозный сульфат мези НЕ. пребустея 15 г калия

Добавляю соответствующее количество катализатора: лля всех продуктов могут быть использованы 9.65 Е СЕ каналу ртути (9.2. Грили 0.7 гокиси рули (11 $5. #111 {5.2.4 наи 0.9-- 1,2 р пягиволного сулыфата мели (Иру

2;. Вместо этого можно применить Н.А тгокией моли

2.4). Установлено. CTO при эгом аля полного обнайу - жения требуется более длительное сжигание.

Примечание. Когла анализируются продукты с высоким содержанием анна. в качестве катали тора использовать ртуть.

25 см ‘серной кислоты (АЗ лая первого грамма сухого вешества навсски и 6-- Г ем на каж - дый грамм сухого вошества тлля крахмала и жира требуется около би 12 ем кислиты. соответственно). Тшательно перемешивают, чтобы полностьвг смочить нансеку Сначала колу нагревают умеренно, чтобы предотвратить полнятие пены ло горла колбы или се выбрасывоние из колбы.

Причечание. Жемтельно лобанить антипенообра вешоство, как. например. парафинавк смо. 415.4}.

ГОСТ 13496.4-93

Нагревакн умеренно. поворачивая времн от времени ло тех пор, пока часса не пбуглитенои не нсчезнст

пена. Затем нагревание до тох пор, пока не установится ранномерное кинение Нагрев ue

заточным. если хинишая кислота конденсируется в середине тора колбы Кьсльазия. Следует избегать перегрена стеноь колоы, не находящихся в контакт ь Есай используют открытое пазмя. такой перегрев мажно прелетнратить путем установления колбы на лист аебеста © огверстием лиамегром немного меньше. чем 1изчетр колбы на уровне

Ви время нагревания колба должна выть установления накланно пол углом 3-4 к верлихлаи.

После оснотления жилкасти продолжают нагревание в течение Ги в случае использования ртутного катади затора или 24 в случае использавания мелного катали тора.

Оставляки остывать. Если холодный минерализат застывает. рекомендуетея ИСПОЛЬЗОВАТЬ ДЛЯ СЖИГАНИЯ Фольшии объем кислаты, чем указано выше.

Х.2.2 Отеовло аммиата

Оцорожно добавляют 251 - 350 см полы лая полного растворения перемешивают круговыми движениями и оставляю остывать. Добаваяют ночного вешества. прелотврашакинето выбрасынание 15.13) Пинсткой переносят в приемную колбу опонного анларата 25 см’ раствора серной кислоты с = = 0.9 или 0.125 "15.9. 1} Концентрацию кислоты выбирают в зависимости от ожидаемого содержания азота в нанеске (примечание к и. & 0). лобавляют ИО 154 см волы и нескольки капель смешанного индикатира 1.119.

Кончик пу@кв холодильника пагружают в жилкость. созержаниюси в приемной колес, на нс менее | см. Медленно па стенкам в колбу Къельлали ввоаят ИИРем” раствора гидроксида натрия 19.7}

Примечание. Если серной кикаотлы 45.3) чем указано (5.2.1. ния абзаи!. саслус? пропорциональны увеличить ибъем тизроксиаа натрия.

Если в качестве испальювались сослинения ртути. раствор тидроксиаа натрия ле внесения в коб смешивают с 25 см’ раствора тиосульфата 45.5. 11

Причечнание. Если длобаваять отдельно. тпосульфат может всгунить в реакцию с в колос ‹ обрашванием сулыфриаа волорила. что приводит к искажению ре пльтатов. Вместо гиосульфита можно ис- поль юнать гилофоесфит 1.5.2). В лом случае нет опасности образования сульфила волорола. Г гтинофосфита. лафаяленного в тнераом визе нисае ра авления волой до приливания шелочи. ластаточно дан осажления Е т ртути.

Кибу немелленни присосанняют к опонному аппарату и нагревают с такой интенсивностью, за мин собрать 150 ем’ листиалята. После этого бумагой (5 12 проверяют рН дистиланга на кончике имОки лолозильника. Если реакция щелочная. продолжают

Канчик трубки холодильника ера после чкончании листилавиии вынимают из лололильника, чтобы предотвратить обратное зеасывзание. Если во время опонки вриемной колоы стэновитея шелонным. определение повторяют, вносн соответетвующие изменения. При опонке аммизка в борную в приемную колох омонного зппарата налинают Ир 25% ou! раствора Gopatoit AME E8904,

Х.2.3 Татрование

Рени в качестве поглошающей жилкости была иснользювана сернан кисаюта. ес избыток титруют раствором гидроксида нагрия с (Хао Нт= и. наи 0.25 мольгам 45. ИЕР) ди перехода финастовой окраски в зеленую.

Если в качестве поглошающей жильисти была исполь юнана борная кислота. аммиак тигруют раствером хернои кислоты Ол = 1.05 или 0.125 мольгам И 15 ао перехода окраски раствора ог зеденой до фи-

Рокоменцегся титрование проводить но нремя так как эта позволяег уточнить конси лис- Окончание листиллниии похатыяаст изменение окраски смешанного инликатора 1 111.

Еьаи невозможно провилить титрование оановременно с опонкой. слелуст титронать сера после окончанин слеля за тем. чтобы температура листиллята не превышая 25 ©. При лих уеловиях пагери аммиака ют

хз Чикало определений

Проводят два ипреаедения полного обра таз

Х4 Холостое определение

Холастае опреасасние провелнт. используя (5.5 в качестве ислытуемой пробы

Хх Контрольный анзааи о

Кангрольный знали; проволят путем определения содержания вина в ацетанилизе |) наи трингофане дофаваляя [т сахарезы С 5}

Выбор анализируемого вешества лая контрольного анали м зависигогтога, насколько легко а ими непы цсмые пробы. Ацетэнилиа о ямястся легко. в то времн KOK сжигастся Триптофан перед использаванием слолуег высушить

1.03 4 - при содержании азота менсс 3 ати к Е Я относительно срелнега резудьтата при созержании зи ог аа 6 Ч фи ОА @ -- при спаержании зюта больше 6 бе тени.

92 Вычисление холержания сырого протеина Содержание сыроги протеина в прозукте вычисляют умножением содержания аита на ко 6.2%.

Результаты вычнеляют с точностью 0.1 о имо 10 Прогокол испытания

В протоколе испызаних следует уканиь использованный метод и полученныи резмльтат. уканиь ко пересчета чт 6.25). использованный для пересчета содержания чина на сырой протеин. \еловия ныполнения энадизи. не указанные н насгояшем международном станларте или рассматривас- мые как необязалельные. так же как любыс ибстонтельстьи. которые чогут ваинть на результат.

Все документы, представленные в каталоге, не являются их официальным изданием и предназначены исключительно для ознакомительных целей. Электронные копии этих документов могут распространяться без всяких ограничений. Вы можете размещать информацию с этого сайта на любом другом сайте.

Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение массовой доли азота и вычисление массовой доли сырого протеина. Метод Къельдаля


Обозначение стандарта:

Статус стандарта:	действующий

Название рус.:	Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение массовой доли азота и вычисление массовой доли сырого протеина. Метод Къельдаля

Название англ.:	Feeds, mixed feeds and raw material. Determination of mass fraction of nitrogen and calculation of mass fraction of crude protein. Kjeldahl method

Дата введения в действие:	01.01.2001

Область и условия применения:	Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания азота и метод вычисления содержания сырого протеина в кормах, комбикормах и комбикормовом сырье методом Кьельдаля

Список изменений:	№0 от --2002-01-15 (рег. --2002-01-15) «Дата введения перенесена»

Приложение №1:

	c=&f2=3&f1=II001&l=">ОКС Общероссийский классификатор стандартов c=&f2=3&f1=II001065&l=">65 СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО c=&f2=3&f1=II001065120&l=">65.120 Корма для животных * Микробиология кормов для животных см. 07.100.30 c=&f2=3&f1=II002&l=">КГС Классификатор государственных стандартов c=&f2=3&f1=II002015&l=">С Сельское и лесное хозяйство c=&f2=3&f1=II002015001&l=">С1 Полевые культуры c=&f2=3&f1=II002015001009&l=">С19 Методы испытаний. Упаковка. Маркировка